發(fā)布時(shí)間：2017-06-27 07:16

  本文關(guān)鍵詞：腸鐵轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)在細(xì)菌侵染腸上皮細(xì)胞中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：營養(yǎng)免疫是宿主抵抗微生物的一個(gè)重要防御屏障。微生物侵染宿主時(shí),宿主能夠限制微生物利用營養(yǎng)。研究表明,營養(yǎng)免疫的重要方式之一是對金屬離子如鐵、鋅和錳的限制。鐵作為微量元素之一,在生物的生命活動(dòng)中發(fā)揮著尤為重要的作用。食物鐵主要通過十二指腸上皮細(xì)胞吸收。病原微生物感染生物體的重要部位為腸道。哺乳動(dòng)物腸上皮細(xì)胞鐵吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體系主要由三個(gè)基因DMT1、Ftn和Fpnl構(gòu)成,分別參與鐵吸收、胞內(nèi)貯存和釋放。在腸上皮細(xì)胞中,病原細(xì)菌侵染后,是否會(huì)影響DMT1、Ftn和Fpnl基因的表達(dá),且腸上皮細(xì)胞鐵吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體系相關(guān)基因在細(xì)菌侵染細(xì)胞中的作用目前還不清楚。本論文主要圍繞細(xì)菌侵染人類腸上皮細(xì)胞時(shí),腸鐵吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體系是否在抵抗細(xì)菌侵染中的作用進(jìn)行研究。我們的研究結(jié)果表明,腸上皮細(xì)胞的鐵吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體系的相關(guān)基因被沉默后,導(dǎo)致Caco-2細(xì)胞對病原細(xì)菌沙門氏菌(Salmonella typhimurium)抵抗降低,表明腸上皮細(xì)胞鐵吸收體系在病原細(xì)菌沙門氏菌侵染宿主中發(fā)揮著重要作用。同時(shí),我們還發(fā)現(xiàn),沙門氏菌侵染后導(dǎo)致DMT1、Ftn和Fpnl的表達(dá)升高；并且胞內(nèi)菌沙門氏菌和胞外菌銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa) PA14侵染細(xì)胞對三個(gè)基因表達(dá)水平影響不同,銅綠假單胞菌PA14侵染細(xì)胞時(shí)三個(gè)基因DMT1、Fpnl和Ftn的表達(dá)量無顯著差異。綜上所述,我們的研究結(jié)果表明：哺乳動(dòng)物腸道上皮細(xì)胞的鐵吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體系在細(xì)菌侵染宿主時(shí)發(fā)揮重要作用。
【關(guān)鍵詞】：鐵吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體系 腸上皮細(xì)胞 病原細(xì)菌 侵染
【學(xué)位授予單位】：云南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R378
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 第一章 緒論9-22
• 一、研究的宿主與病原菌簡介9-12
• 1.1 Caco-2人類腸道上皮細(xì)胞9
• 1.2 沙門氏菌簡介9-11
• 1.3 沙門氏菌與相關(guān)疾病11-12
• 二、腸道上皮細(xì)胞鐵吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體系研究進(jìn)展12-14
• 2.1 腸上皮細(xì)胞鐵吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體系的組成12-13
• 2.2 腸道在天然免疫中的地位13
• 2.3 腸上皮細(xì)胞鐵吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體系相關(guān)基因的表達(dá)受鐵含量水平的調(diào)控13-14
• 三、鐵在天然免疫和細(xì)菌侵染中的重要性14-22
• 3.1 天然免疫中鐵的作用14-16
• 3.2 細(xì)菌侵染中鐵的重要性16-17
• 3.3 病原菌獲得鐵的方式17-19
• 3.3.1 胞外菌17
• 3.3.2 胞內(nèi)菌17-19
• 3.3.3 真菌19
• 3.4 鐵的新陳代謝與鐵蛋白的作用19-22
• 3.4.1 鐵輸出蛋白19-20
• 3.4.2 鐵調(diào)素20
• 3.4.3 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體20
• 3.4.4 Toll-like receptors20-22
• 第二章 實(shí)驗(yàn)材料和方法22-35
• 一、實(shí)驗(yàn)儀器、試劑、培養(yǎng)基22-25
• 1.1 主要儀器22
• 1.2 主要試劑22-23
• 1.3 主要試劑盒23
• 1.4 主要培養(yǎng)基及配制方法23
• 1.5 常用溶液的配制23-25
• 二、實(shí)驗(yàn)材料25
• 2.1 實(shí)驗(yàn)所用到的細(xì)胞25
• 2.2 實(shí)驗(yàn)菌株25
• 2.3 實(shí)驗(yàn)器具25
• 三、實(shí)驗(yàn)方法25-35
• 3.1 細(xì)胞復(fù)蘇25
• 3.2 細(xì)胞培養(yǎng)25-26
• 3.3 細(xì)胞消化26
• 3.4 細(xì)胞凍存26
• 3.5 siRNA沉默26-28
• 3.6 細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染28
• 3.7 MOI的選取方法28-29
• 3.8 細(xì)菌CFU29
• 3.9 細(xì)菌OD值的測定29
• 3.10 細(xì)胞以及細(xì)菌計(jì)數(shù)29-30
• 3.11 細(xì)胞MTT測定30
• 3.12 細(xì)胞侵染30-31
• 3.13 細(xì)胞RNA提取31
• 3.14 反轉(zhuǎn)錄cDNA的合成31-32
• 3.15 定量QPCR32-34
• 3.16 細(xì)胞基因組提取34-35
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-46
• 一、胞內(nèi)病原菌沙門氏菌可以激活Caco-2腸上皮細(xì)胞鐵吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體系35-37
• 二、胞外病原菌銅綠假單胞菌不能激活Caco-2腸上皮細(xì)胞鐵吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體系37-40
• 三、siRNA干擾Caco-2腸上皮細(xì)胞鐵吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體系的相關(guān)基因40-41
• 四、Ftn、Fpn1限制Caco-2細(xì)胞中沙門氏菌的增殖41-43
• 五、腸上皮細(xì)胞鐵吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體系在沙門氏菌侵染Caco-2細(xì)胞中發(fā)揮重要作用43-46
• 第四章 討論46-48
• 參考文獻(xiàn)48-54
• 致謝54-55

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 石辛甫,高杰英;腸上皮間淋巴細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];免疫學(xué)雜志;1998年04期

2 曾小川，，汪維偉;胚胎腸上皮的組織發(fā)生機(jī)制之研究進(jìn)展[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1998年03期

3 Trier J S ,楊希山;腸M細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能[J];國外醫(yī)學(xué)(消化系疾病分冊);1992年03期

4 周靜,王杉,葉穎江,楊q

本文編號：488892