本文關(guān)鍵詞：布魯氏菌Omp19基因真核載體的構(gòu)建及對(duì)細(xì)胞免疫的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的了解羊種布魯氏菌Omp19基因在真核細(xì)胞中的表達(dá)和對(duì)細(xì)胞免疫的影響。方法根據(jù)GenBank公布的羊布魯氏菌16M株外膜蛋白Omp19基因序列設(shè)計(jì)1對(duì)引物,以其全基因組為模板進(jìn)行擴(kuò)增,Omp19基因擴(kuò)增片段連接pMD18-T載體,轉(zhuǎn)染及測(cè)序鑒定正確后進(jìn)行雙酶切,構(gòu)建重組質(zhì)粒pLEX-MSC-Omp19,轉(zhuǎn)染巨噬細(xì)胞RAW264.7中,用Western blot分析Omp19基因在巨噬細(xì)胞內(nèi)的表達(dá),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)轉(zhuǎn)染Omp19基因的細(xì)胞干擾素-γ(IFN-γ)和IL-6分泌的影響。結(jié)果獲得534bp目的基因片段并成功構(gòu)建Omp19真核表達(dá)載體,Omp19基因在巨噬細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá),表達(dá)蛋白Omp19可顯著提高細(xì)胞分泌IFN-γ和IL-6水平(P0.01)。結(jié)論 Omp19基因表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)具有免疫原性,能提高細(xì)胞免疫水平,可作為亞單位疫苗候選基因。
【作者單位】： 銅仁學(xué)院護(hù)理學(xué)院;銅仁學(xué)院生物與農(nóng)林工程學(xué)院;石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院;銅仁市動(dòng)物疫病防控中心;石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 布魯氏菌 omp基因 真核載體 細(xì)胞免疫
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31502067) 杰出青年科技人才培育計(jì)劃項(xiàng)目(No.2013ZRKXJQ06) 教育廳自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(黔教合KY字[2015]411號(hào)) 貴州省科技合作計(jì)劃項(xiàng)目(黔科合LH字[2015]7238號(hào);黔科合LH字[2015]7236號(hào);黔科合LH字[2015]7237號(hào)) “野生動(dòng)植物保護(hù)與利用”-省級(jí)重點(diǎn)學(xué)科項(xiàng)目(黔學(xué)位辦[2013]18號(hào)) 博士科研啟動(dòng)基金項(xiàng)目(No.trxyDH1504)
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： ***布魯氏菌病是由布魯氏菌引起的人獸共患傳染病[1-2]。布魯氏菌為革蘭陰性兼性胞內(nèi)寄生菌,人體感染布魯氏菌急性期主要表現(xiàn)為惡寒、發(fā)熱、關(guān)節(jié)和肌肉痛等,可造成骨關(guān)節(jié)、神經(jīng)系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)等損害,慢性期主要為骨關(guān)節(jié)病及包括神經(jīng)系統(tǒng)在內(nèi)的多系統(tǒng)多器官損害,患者

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 杜志強(qiáng);林濤;王建英;;布魯氏菌外膜蛋白基因omp19序列克隆與原核表達(dá)[J];生物技術(shù);2013年06期

  本文關(guān)鍵詞：布魯氏菌Omp19基因真核載體的構(gòu)建及對(duì)細(xì)胞免疫的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：469694