本文關(guān)鍵詞：綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)染示蹤比格犬體內(nèi)骨髓間充質(zhì)干細胞分化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的運用綠色熒光蛋白(GFP)標記技術(shù),觀察骨組織工程中種子細胞的變化和轉(zhuǎn)歸。方法使用重組腺病毒(Ad-GFP)將GFP基因轉(zhuǎn)染比格犬骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSC),倒置相差顯微鏡下觀察BMSC形態(tài)、堿性磷酸酶(ALP)和茜素紅染色情況;熒光顯微鏡下觀察細胞GFP表達狀況。待細胞標記成功后將其離心,接種于β-磷酸三鈣(β-TCP)上,回植于比格犬脛骨內(nèi)側(cè)骨膜囊內(nèi),構(gòu)建組織工程骨記為A組;單純β-TCP植入對稱脛骨內(nèi)側(cè)骨膜囊記為B組;單純β-TCP植入皮下記為C組。術(shù)后2周取材,分別行組織學觀察、免疫組化檢測,同時激光共聚焦顯微鏡下觀察GFP表達情況。結(jié)果體外成骨誘導實驗顯示,ALP染色以及茜素紅染色陽性。組織學觀察可見,A組新生骨組織以及新生血管均較B組明顯,C組未見新生骨組織。免疫組化檢測顯示,A組Ⅰ型膠原、血小板內(nèi)皮細胞黏附分子CD31染色陽性;B組Ⅰ型膠原、CD31染色部分陽性;C組未見陽性表達。免疫組化半定量檢測顯示,A、B兩組Ⅰ型膠原、CD31定量有統(tǒng)計學差異(P0.05)。激光共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果顯示,A組新生骨組織內(nèi)可見GFP表達,B、C組未見GFP標記細胞。結(jié)論 BMSC是組織工程骨早期形成的重要來源,但周圍成骨細胞并非新生骨組織主要來源;移植BMSC于骨膜下可促進新生血管形成。
【作者單位】： 上海交通大學醫(yī)學院附屬第九人民醫(yī)院整復外科;上海市骨科內(nèi)植物重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 骨組織工程 綠色熒光蛋白 骨髓間充質(zhì)干細胞
【基金】：國家自然科學基金(81272132)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSC)是造血微環(huán)境中的一種重要細胞成分,獲取相對容易,在特定的理化環(huán)境和細胞因子誘導下,可分化為成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、內(nèi)皮細胞等多種類型細胞,且免疫原性弱,是組織工程理想的種子細胞來源[1-4]。然而,新生組織工程骨的細胞來源是體外植入BMSC

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