本文關(guān)鍵詞：一株銅綠假單胞菌RNA噬菌體的分離和鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：近幾年來,由于抗生素在臨床以及畜牧養(yǎng)殖業(yè)的大量使用,而新抗生素的開發(fā)少之又少,使得細(xì)菌的耐藥性問題日益嚴(yán)峻,甚至出現(xiàn)了幾乎無藥可用的“超級(jí)細(xì)菌”,這給臨床治療帶來了非常嚴(yán)重的挑戰(zhàn),尤其是多重耐藥菌株的抗感染問題已經(jīng)成為目前臨床治療的難點(diǎn)。銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA),也被稱為綠膿桿菌,是臨床上常見的革蘭陰性條件致病菌,在自然界中分布極為廣泛,各種水、空氣、正常人的皮膚、呼吸道和腸道等都有存在。作為醫(yī)院內(nèi)感染的主要病原菌之一,銅綠假單胞菌對(duì)多種抗生素都具有耐藥性,在此背景下,尋找抗銅綠假單胞菌感染的新的治療方法十分必要。噬菌體是一類在自然界中廣泛分布,專性感染以及裂解細(xì)菌的病毒。其基因數(shù)目較少,增殖速度較快又易于培養(yǎng)。1915年,噬菌體由Frederick W.T.首次發(fā)現(xiàn),此后人們就嘗試用噬菌體來治療細(xì)菌性感染,但一直都未能取得根本性的突破。近幾年來,由于細(xì)菌耐藥性的問題日益嚴(yán)重,噬菌體治療重新回歸人們視野,并被認(rèn)為是抗生素治療之外的又一種抗感染手段。本文以一株可以分泌紅色色素的銅綠假單胞菌臨床分離株P(guān)AO38為宿主菌,從西南醫(yī)院下水道污水中分離得到了一株可以將其裂解的RNA噬菌體,我們將其命名為PaP6。得到該噬菌體后,對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行了重點(diǎn)研究,包括其最佳感染復(fù)數(shù)、一步生長(zhǎng)曲線、結(jié)構(gòu)蛋白、氯仿敏感性以及宿主譜等。這些數(shù)據(jù)為今后對(duì)其進(jìn)一步的深入研究、基因工程改造、噬菌體治療等研究奠定了必要的基礎(chǔ),并且豐富了對(duì)噬菌體多樣性的認(rèn)識(shí)。研究?jī)?nèi)容及結(jié)果具體包括以下幾個(gè)方面:1.以銅綠假單胞菌PAO38為宿主菌,從西南醫(yī)院的污水中分離得到一株可以裂解PAO38菌株的噬菌體,命名為PaP6(Pseudomonas aeruginosa Phage 6)。電鏡下觀察發(fā)現(xiàn)PaP6有一個(gè)正多面體的頭部,頭部大小約為45 nm。2.提取噬菌體PaP6的基因組,電泳分析表明該基因組天然以三個(gè)節(jié)段存在。酶切分析表明,該基因組為雙鏈結(jié)構(gòu),對(duì)DNAase不敏感,但對(duì)RNAase敏感,說明其為RNA噬菌體,且三個(gè)片段長(zhǎng)度分別約為9 Kb、4.5 Kb和3.5 Kb,全基因組約17 kb。3.實(shí)驗(yàn)還測(cè)定了噬菌體PaP6的最佳感染復(fù)數(shù)(MOI)以及一步生長(zhǎng)曲線。其MOI為0.1,噬菌體滴度達(dá)到了8.5×109 PFU。噬菌體PaP6感染宿主菌的潛伏期約是10 min,爆發(fā)期約為50 min,得出PaP6感染宿主菌PAO38的爆發(fā)量約為10。4.PaP6可以感染40.1%的銅綠假單胞菌臨床分離株,是一株比較廣譜的噬菌體。
【關(guān)鍵詞】：銅綠假單胞菌 雙鏈RNA噬菌體 囊病毒科噬菌體 生物學(xué)特性
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R378
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 英文摘要6-8
• 中文摘要8-10
• 第一章 前言10-13
• 第二章 銅綠假單胞菌噬菌體PaP6的分離和鑒定13-21
• 2.1 宿主菌PAO38噬菌體PaP6的分離和鑒定13-21
• 第三章 噬菌體PaP6的生物學(xué)特性21-36
• 3.1 噬菌體PaP6最佳感染復(fù)數(shù)的測(cè)定21-23
• 3.2 噬菌體PaP6一步生長(zhǎng)曲線的繪制23-26
• 3.3 噬菌體PaP6結(jié)構(gòu)蛋白的分析26-30
• 3.4 噬菌體PaP6對(duì)氯仿敏感性的研究30-33
• 3.5 噬菌體PaP6宿主譜的研究33-36
• 全文總結(jié)36-37
• 全文討論37-39
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 文獻(xiàn)綜述 噬菌體治療銅綠假單胞菌感染的研究現(xiàn)狀和前景44-62
• 參考文獻(xiàn)54-62
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文62-63
• 致謝63

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 林曉 ,陳美云 ,林其昌 ,陳公平;222株銅綠假單胞菌藥敏結(jié)果[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2002年10期

2 王炳華;王炳云;;106株銅綠假單胞菌藥敏結(jié)果分析[J];基層醫(yī)學(xué)論壇;2004年06期

3 黃志強(qiáng);李麗君;盧娟;;肺結(jié)核病合并感染銅綠假單胞菌的藥敏分析[J];臨床肺科雜志;2010年09期

4 封尊玉;;銅綠假單胞菌的治療策略[J];海南醫(yī)學(xué);2010年21期

5 劉萍;張志倫;倪丹妮;吳杰紅;;銅綠假單胞菌產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶因素分析[J];中華醫(yī)院感染學(xué)雜志;2011年23期

6 吳麗娟,熊爾陽,鄧光貴;聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)銅綠假單胞菌的研究現(xiàn)狀[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè);1996年06期

7 周鐵麗,曹建明;一種鑒定銅綠假單胞菌的新方法[J];陜西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn);1997年04期

8 朱小平;78株銅綠假單胞菌藥敏結(jié)果的初步探討[J];江蘇臨床醫(yī)學(xué)雜志;1999年05期

9 孫東華,邊瑞巖,孫躍軍,王慶敏;銅綠假單胞菌污染礦泉水調(diào)查分析[J];環(huán)境與健康雜志;2000年04期

10 張文英;86株銅綠假單胞菌的耐藥調(diào)查[J];華夏醫(yī)學(xué);2000年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 方莉;許媛;黃義山;蔡燕;唐中;楊明輝;廖濤;;銅綠假單胞菌金屬β-內(nèi)酰胺酶基因的檢測(cè)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國(guó)醫(yī)院協(xié)會(huì)臨床檢驗(yàn)管理專業(yè)委員會(huì)第六屆全國(guó)臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

2 周明明;周鐵麗;李超;吳慶;陳櫟江;吳蓮鳳;彭定輝;;主動(dòng)外排在銅綠假單胞菌耐藥中的作用研究[A];2009年浙江省檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

3 陳邦;王琰;茍曉峰;陳林;;嘧霉胺對(duì)銅綠假單胞菌基因的調(diào)節(jié)[A];第六屆全國(guó)化學(xué)生物學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

4 朱丹;李欣;;對(duì)亞胺培南耐藥的銅綠假單胞菌的體外藥敏分析[A];2005年浙江省呼吸系病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2005年

5 洪波;貢聯(lián)兵;;銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南的藥敏分析[A];第五次全國(guó)中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

6 徐海茹;田彬;岳娜;胡志東;;臨床分離的銅綠假單胞菌耐藥結(jié)果分析[A];第五次全國(guó)中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

7 趙書平;姜梅杰;;神經(jīng)內(nèi)科重癥監(jiān)護(hù)室銅綠假單胞菌氨基糖苷類修飾酶基因研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

8 張杜超;方向群;;微重力對(duì)銅綠假單胞菌毒力影響及與肺部感染關(guān)系[A];2011年空間生命與生命起源暨航天醫(yī)學(xué)工程學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

9 李春梅;鐘曉祝;;銅綠假單胞菌醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)分析[A];中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)消毒分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2010年

10 熊娟;梁麗紅;;尿液中分離出產(chǎn)紅膿素的銅綠假單胞菌[A];2012全國(guó)臨床微生物與感染免疫學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院 俞云松;銅綠假單胞菌耐藥全國(guó)流行[N];健康報(bào);2008年

2 李曙平;銅綠假單胞菌 老年病房的主要致病菌[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

3 王振嶺;銅綠假單胞菌耐藥問題嚴(yán)重[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

4 天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院檢驗(yàn)科 胡志東;關(guān)注銅綠假單胞菌對(duì)碳青霉烯類藥物的耐藥[N];健康報(bào);2009年

5 ;碳青霉烯類抗生素[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2007年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張瑞琴;氟喹諾酮類藥物誘導(dǎo)銅綠假單胞菌耐藥性及分子機(jī)制的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

2 曹振輝;銅綠假單胞菌裂解性噬菌體的篩選、鑒定及應(yīng)用[D];大連理工大學(xué);2015年

3 蘇甜甜;銅綠假單胞菌鞭毛及生物膜調(diào)控蛋白FleQ和糖苷水解酶PslG的結(jié)構(gòu)與功能研究[D];山東大學(xué);2015年

4 張明亮;銅綠假單胞菌F_(190-342)-I_(21-83)基因重組鼠傷寒沙門菌的構(gòu)建及實(shí)驗(yàn)免疫研究[D];吉林大學(xué);2015年

5 蔡雙啟;銅綠假單胞菌對(duì)頭孢哌酮鈉/舒巴坦鈉的耐藥變遷及差異蛋白組學(xué)和比較基因組學(xué)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2016年

6 倪磊;銅綠假單胞菌蹭行運(yùn)動(dòng)和表面感知機(jī)制的研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2016年

7 張秋勤;生鮮雞肉中腐敗菌群體感應(yīng)信號(hào)分子研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

8 宋思捷;輕型鏈球菌促進(jìn)銅綠假單胞菌致病性及機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

9 張若文;燒傷病房耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌耐藥機(jī)制及分子流行病學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2012年

10 張亞妮;谷胱甘肽與銅綠假單胞菌致病性及抗生素抗性的關(guān)系研究[D];西北大學(xué);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 吳蘇敏;光動(dòng)力療法抗多重耐藥銅綠假單胞菌感染的研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

2 賈子中;黃連素對(duì)燒傷創(chuàng)面銅綠假單胞菌生物膜干預(yù)試驗(yàn)及自制中藥臨床應(yīng)用觀察[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

3 王穎;新型抗耐藥革蘭氏陰性菌藥物的篩選研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

4 馬超;無機(jī)鎵化合物抗菌性能研究[D];西南交通大學(xué);2015年

5 李九龍;PA0861在銅綠假單胞菌PAO1中作用的研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2015年

6 梁紅梅;銅綠假單胞菌ATCC27853對(duì)秀麗隱桿線蟲的毒性研究[D];蘭州大學(xué);2015年

7 胡凡;銅綠假單胞菌的耐藥表型與耐藥基因型研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

8 王國(guó)旗;負(fù)壓創(chuàng)面療法治療銅綠假單胞菌感染創(chuàng)面的相關(guān)機(jī)制研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

9 饒慧華;clpP基因在銅綠假單胞菌毒力中的作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

10 姚遠(yuǎn);乳酸鈉抑制銅綠假單胞菌的優(yōu)化建模及其對(duì)豬肉持水力和蛋白質(zhì)的影響[D];上海理工大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：一株銅綠假單胞菌RNA噬菌體的分離和鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：447510