本文關(guān)鍵詞：牛血清IgG雙抗體夾心ELISA定量檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立牛血清Ig G(bovine immunoglobulin G,BIg G)抗原的雙抗體夾心ELISA定量檢測(cè)方法。方法用BIg G-Fc免疫BALB/c小鼠,制備抗BIg G單抗,確定包被抗體及酶標(biāo)抗體后,建立定量檢測(cè)BIg G抗原的雙抗體夾心ELISA方法,并驗(yàn)證該方法的準(zhǔn)確度、精密度、穩(wěn)定性、特異性,確定該方法的線性范圍和定量限度。應(yīng)用建立的方法檢測(cè)不同廠家、不同批次牛血清及純化EV71樣品中BIg G抗原殘留量。結(jié)果建立了以3E12D2為包被單抗(8.0μg/ml,100μl/孔),4A2G1B1-HRP為酶標(biāo)抗體(1∶1 000稀釋,100μl/孔)定量檢測(cè)BIg G的雙抗體夾心ELISA方法,該方法的線性范圍為0.3~9.6 ng/ml,R~20.99,定量限度為0.3 ng/ml;回收率在94.1%~108.5%之間,同一實(shí)驗(yàn)者重復(fù)檢測(cè)和不同實(shí)驗(yàn)者檢測(cè)的變異系數(shù)均10%;37℃放置3和6 d的穩(wěn)定性均90%;該試劑樣品與BIg G可發(fā)生特異性反應(yīng),與其他動(dòng)物源血清無交叉反應(yīng)。9批牛血清中BIg G含量均存在差異;精純樣品較粗純樣品BSA和BIg G均明顯去除,但BIg G占牛血清殘留量(BSA+BIg G)的比例卻明顯上升。結(jié)論建立的BIg G抗原的雙抗體夾心ELISA方法符合定量檢測(cè)需要,可用于牛血清的質(zhì)量質(zhì)控及殘留量檢測(cè)。
【作者單位】： 北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 牛血清IgG 單克隆抗體 雙抗體夾心ELISA
【分類號(hào)】：R392-33
【正文快照】： 目前,國內(nèi)外生產(chǎn)病毒性疫苗均采用細(xì)胞培養(yǎng)法,牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)的主要成分之一,尤其在二倍體細(xì)胞培養(yǎng)上不可或缺,但人體接種此類疫苗后,可能引發(fā)過敏性休克等不良反應(yīng)。目前報(bào)道的過敏成分主要是牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)和牛血清Ig G(bovine immunoglobulin G,

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1 張韞;陳亞利;宋詩雨;王森;王e，

本文編號(hào)：441097