CARM1維持羊水干細(xì)胞干性的機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2017-06-05 11:06
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【摘要】:背景:研究表明,CARM1催化的組蛋白H3R17/R26的甲基化修飾對(duì)于胚胎干細(xì)胞干性的維持起著非常重要的作用,但其在羊水干細(xì)胞干性維持中的作用及機(jī)制目前尚不明確。目的:初步探討CARM1在維持羊水干細(xì)胞干性中的作用及其分子機(jī)制。方法:分離、培養(yǎng)人妊娠晚期羊水干細(xì)胞,RT-PCR鑒定干細(xì)胞標(biāo)志物及CARM1基因的表達(dá)。利用CARM1的兩條shR NA慢病毒表達(dá)載體,沉默羊水干細(xì)胞中CARM1基因的表達(dá)。RT-qP CR檢測(cè)CARM1基因的表達(dá)沉默效率,Western blot檢測(cè)組蛋白H3R17的甲基化水平。RT-qP CR檢測(cè)干細(xì)胞標(biāo)志物OCT4,SOX2和NANOG基因的表達(dá)水平。結(jié)果與結(jié)論:(1)人妊娠晚期羊水干細(xì)胞能夠表達(dá)干細(xì)胞標(biāo)志物,包括OCT4、SOX2、Nanog和KLF4,并表達(dá)CARM1基因;(2)CARM1的兩條shR NA均能夠有效沉默CARM1基因的表達(dá);(3)CARM1表達(dá)沉默后,羊水干細(xì)胞中組蛋白H3R17的甲基化水平降低,OCT4和SOX2的表達(dá)也降低,而NANOG的表達(dá)沒有發(fā)生變化;(4)結(jié)果表明,CARM1可能通過調(diào)控OCT4和SOX2基因的表達(dá),進(jìn)而起到維持羊水干細(xì)胞干性的作用。
【作者單位】: 上海市兒童醫(yī)院上海交通大學(xué)附屬兒童醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;上海市兒童醫(yī)院上海交通大學(xué)附屬兒童醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】: 干細(xì)胞 羊水 妊娠末期 蛋白質(zhì)精氨酸N-甲基轉(zhuǎn)移酶 慢病毒感染 甲基化 組織工程 分化 羊水干細(xì)胞 妊娠晚期 CARM 慢病毒 sh RNA 表達(dá)沉默 OCT SOX HR甲基化 干性 國(guó)家自然科學(xué)基金
【基金】:上海市衛(wèi)生局青年科研項(xiàng)目(20124y0700) 國(guó)家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目(81401763)~~
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 0引言Introductionmethyltransferase 4,PRMT4),屬于蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)近年來發(fā)現(xiàn)羊水中含有干細(xì)胞,并命名為羊水干細(xì)移酶家族中的蛋白成員,可催化細(xì)胞內(nèi)組蛋白及非組蛋胞(amniotic fluid-derived stem cell,AFSC)[1-3]。羊水干白精氨酸殘基的甲基化修飾。作為一種轉(zhuǎn)錄共激活因
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1 吳靜;精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶CARM1促進(jìn)基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的分子機(jī)制的研究[D];華東師范大學(xué);2011年
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本文編號(hào):423566
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