結(jié)核分枝桿菌TB10.4真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及免疫特性鑒定
本文關(guān)鍵詞:結(jié)核分枝桿菌TB10.4真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及免疫特性鑒定,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:以卡介苗(BCG)基因組、pEGFP質(zhì)粒為模板,PCR擴(kuò)增分別獲得TB10.4基因片段、GFP-TB10.4融合基因片段,連接pVAX1真核表達(dá)載體,測序和酶切鑒定正確,分別命名為pVAX1-TB10.4和pVAX1-GFP-TB10.4;將重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染COS-7和HEK293T細(xì)胞,反轉(zhuǎn)錄PCR表明TB10.4基因成功轉(zhuǎn)錄,間接免疫熒光試驗(yàn)顯示2種蛋白均能瞬時(shí)表達(dá);再將重組質(zhì)粒pVAX1-TB10.4免疫小鼠。結(jié)果表明:該質(zhì)粒能夠誘導(dǎo)低水平的抗體應(yīng)答,同時(shí)誘發(fā)IFN-γ表達(dá),并且能夠加強(qiáng)BCG初次免疫后的免疫應(yīng)答效果。該研究構(gòu)建的真核表達(dá)質(zhì)粒pVAX1-TB10.4能夠誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生抗TB10.4免疫應(yīng)答,為后續(xù)TB10.4蛋白生物學(xué)功能研究提供良好的生物材料。
【作者單位】: 揚(yáng)州大學(xué)江蘇省人獸共患病學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】: 結(jié)核分枝桿菌 TB. 真核表達(dá) 免疫應(yīng)答
【基金】:國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(973-2012CB518805) 江蘇省重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目(BE2015343) 江蘇省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(BK20160466) 江蘇高!扒嗨{(lán)工程”和優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程(PADP)
【分類號】:R392
【正文快照】: 結(jié)核病(TB)這種古老的慢性人獸共患病,4 000多年前就已流行全球,而且至今仍威脅著全球近1/3人口的健康[1],引起結(jié)核病的病原主要為結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)?ń槊(BCG)作為1920年研發(fā)的減毒活疫苗,已經(jīng)在全球接種了超過40億人次,目前仍然在全世界范圍內(nèi)免
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3 李s,
本文編號:405524
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