發(fā)布時(shí)間：2025-04-23 03:53

　　Wnt信號通路在進(jìn)化過程中高度保守,參與調(diào)控許多極其重要的生物事件。在胚胎發(fā)育過程中,它不但決定著細(xì)胞的生長、分化,同時(shí)也調(diào)節(jié)著諸如心血管、中樞神經(jīng)等重要器官的分化和形成；而在成體內(nèi),它調(diào)控干細(xì)胞的增殖和分化,控制著組織器官的自我修復(fù)和更新。Wnt信號通路的失調(diào)已被證實(shí)與多種腫瘤發(fā)生密切相關(guān),它的異�；罨赡苁切纬赡[瘤干細(xì)胞的主要原因之一,這使其成為抗腫瘤治療中的關(guān)鍵靶點(diǎn)。然而,由于Wnt信號通路成員很少,使針對它設(shè)計(jì)抑制劑時(shí)可選靶標(biāo)有限,藥物開發(fā)困難重重。近期研究發(fā)現(xiàn),在結(jié)腸癌等Wnt信號異常活化的細(xì)胞中,可以通過抑制Tankyrase1/2的活性,穩(wěn)定支架蛋白Axin的表達(dá)水平,從而使(3-catenin降解,抑制其調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄作用,進(jìn)而使Wnt信號下調(diào)。Tankyrase1/2是一種端粒調(diào)控因子,它通過與TRF1結(jié)合,使端粒酶發(fā)揮功能,從而延長細(xì)胞壽命。在多種癌癥中,均能檢測到Tankyrase高表達(dá),這可能是癌細(xì)胞無限增殖的主要原因之一。抑制Tankyrase1/2的活性能夠同時(shí)調(diào)控上述兩條信號通路,可能給治療癌癥帶來新的希望。 本研究工作主要分為三個(gè)部分：首先以最新發(fā)表的Ta...

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 Wnt信號通路
        1.1.1 β-catenin降解復(fù)合物的分子機(jī)制
        1.1.2 Wnt信號通路與腫瘤
        1.1.3 Wnt信號通路藥物篩選現(xiàn)狀
    1.2 端錨聚合酶結(jié)構(gòu)與功能
    1.3 端錨聚合酶：全新的藥物篩選靶點(diǎn)
    1.4 計(jì)算機(jī)輔助的虛擬篩選系統(tǒng)
        1.4.1 計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)簡介
        1.4.2 計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)方法
        1.4.3 分子對接
        1.4.4 虛擬篩選技術(shù)
    1.5 基于報(bào)告基因的高通量篩選系統(tǒng)
第二章 材料與方法
    2.1 計(jì)算機(jī)虛擬高通量篩選
        2.1.1 所用軟件及工作平臺
        2.1.2 受體結(jié)構(gòu)的獲得
        2.1.3 小分子化合物庫
        2.1.4 打分函數(shù)
        2.1.5 虛擬篩選策略及方法
    2.2 細(xì)胞水平生物活性驗(yàn)證
        2.2.1 化合物
        2.2.2 質(zhì)粒
        2.2.3 菌株
        2.2.4 細(xì)胞
        2.2.5 相關(guān)生物試劑
        2.2.6 實(shí)驗(yàn)耗材
        2.2.7 主要儀器
        2.2.8 分子生物學(xué)常規(guī)方法
        2.2.9 瞬轉(zhuǎn)雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)
        2.2.10 細(xì)胞增殖分析
        2.2.11 統(tǒng)計(jì)分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 計(jì)算機(jī)虛擬篩選結(jié)果
        3.1.1 基于配體相似性的篩選結(jié)果
        3.1.2 基于Tankyrase1/2靶點(diǎn)的大規(guī)模虛擬篩選結(jié)果
        3.1.3 小結(jié)
    3.2 細(xì)胞篩選平臺構(gòu)建及驗(yàn)證
        3.2.1 構(gòu)建響應(yīng)Wnt信號的pGL4.20-TCF-miniP報(bào)告系統(tǒng)
        3.2.2 瞬轉(zhuǎn)pGL4.20-TCF-miniP的報(bào)告系統(tǒng)可被LiCl顯著激活
        3.2.3 小結(jié)
    3.3 虛擬篩選化合物生物活性研究
        3.3.1 待試化合物對Wnt信號通路依賴的熒光報(bào)告系統(tǒng)的影響
        3.3.2 六種化合物對獨(dú)立于Wnt通路的其他信號通路的影響
        3.3.3 六種化合物阻滯Hep-3B及DLD-1癌細(xì)胞的增殖
        3.3.4 小結(jié)
    3.4 分子對接顯示化合物與TNKS 1/2 PARP結(jié)構(gòu)域的相互作用
第四章 討論
    4.1 虛擬篩選
    4.2 細(xì)胞篩選
    4.3 對接模型分析
第五章 結(jié)論
縮略詞表
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間的研究成果
致謝



本文編號：4041177