研究目的:1.探討針刺對(duì)慢性疲勞綜合征(CFS)模型大鼠NK細(xì)胞殺傷活性(NKCC)的影響;2.探討針刺是否通過miR-34a-5p/ERK/pERK依賴或非依賴性途徑調(diào)控NKCC而發(fā)揮對(duì)CFS的免疫調(diào)節(jié)作用。研究方法:1.實(shí)驗(yàn)一、針刺對(duì)CFS模型大鼠NKCC的影響研究:將30只SD大鼠隨機(jī)分為正常組(A組)、模型組(B組)、針刺組(C組),B、C組通過慢性束縛結(jié)合力竭游泳法建立CFS模型,治療期間A、B組予捆綁固定,C組予針刺“肝俞”、“脾俞”、“腎俞”、“后三里”,得氣后平補(bǔ)平瀉,留針15分鐘,治療21d后麻醉采血,采用乳酸脫氫酶法檢測各組NK細(xì)胞活性值。2.實(shí)驗(yàn)二、針刺調(diào)節(jié)CFS模型大鼠NKCC的miR-34a-5p/ERK/pERK機(jī)制研究,(1)第一部分:在實(shí)驗(yàn)一檢測NKCC的同時(shí),采用免疫印跡法檢測NK細(xì)胞ERK1/2、pERK1/2表達(dá),實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測NK細(xì)胞miR-34a-5p的表達(dá)。(2)第二部分:將20只大鼠按相同方法造模后隨機(jī)分為miRNA拮抗組(D組)、生理鹽水組(E組),分別腹腔注射miRNA拮抗劑和等體積生理鹽水,予上述針刺干預(yù),21d后麻醉采血,檢...

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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中文摘要
Abstract
中英文縮略詞表
引言
實(shí)驗(yàn)一: 針刺對(duì)CFS模型大鼠NKCC的影響
    技術(shù)路線圖如下
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.3 主要實(shí)驗(yàn)耗材和儀器
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 動(dòng)物分組
        2.2 動(dòng)物造模
        2.3 干預(yù)方法
        2.4 動(dòng)物取材及標(biāo)本處理
        2.5 LDH法檢測CFS模型大鼠NK細(xì)胞殺傷活性
        2.6 統(tǒng)計(jì)分析
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 造模后結(jié)果
        3.2 治療后結(jié)果
實(shí)驗(yàn)二：針刺調(diào)節(jié)CFS模型大鼠NKCC的mi R-34a-5p/ ERK/p ERK機(jī)制研究
    第一部分：針刺對(duì)CFS模型大鼠mi R-34a-5p/ERK/p ERK通路的影響
        1.實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.3 主要實(shí)驗(yàn)耗材和儀器
        2.實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 動(dòng)物分組
            2.2 動(dòng)物造模
            2.3 干預(yù)方法
            2.4 動(dòng)物取材及標(biāo)本處理
            2.5 q RT-PCR檢測CFS模型大鼠NK細(xì)胞mi R-34a-5p
            2.6 WB檢測CFS模型大鼠NK細(xì)胞ERK1/2、p ERK1/2 的表達(dá)
            2.7 統(tǒng)計(jì)分析
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    第二部分：抑制mi R-34a-5p/ERK/p ERK通路對(duì)CFS模型大鼠NKCC針刺調(diào)節(jié)作用的影響
        1.實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.3 主要實(shí)驗(yàn)耗材和儀器
        2.實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 動(dòng)物分組
            2.2 動(dòng)物造模
            2.3 干預(yù)方法
            2.4 動(dòng)物取材及標(biāo)本處理
            2.5 q RT-PCR檢測CFS模型大鼠NK細(xì)胞mi R-34a-5p
            2.6 WB檢測CFS模型大鼠NK細(xì)胞ERK1/2、p ERK1/2 的表達(dá)
            2.7 LDH法檢測CFS模型大鼠NK細(xì)胞殺傷活性
            2.8 統(tǒng)計(jì)分析
        3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
    1.CFS免疫功能異常研究進(jìn)展
    2.NKCC減弱可能是CFS免疫功能異常的核心標(biāo)志
    3.miR-34a-5p/ERK/p ERK通路下調(diào)可能是CFS患者NKCC減弱的關(guān)鍵原因
    4.針灸治療CFS免疫功能異常研究進(jìn)展
    5.本研究方案的確定
        5.1 造模方法的選擇
        5.2 針灸干預(yù)方案的選擇
    6.針刺對(duì)CFS模型大鼠NKCC的影響
    7.針刺調(diào)控CFS模型大鼠NKCC的mi R-34a-5p/ERK/ p ERK機(jī)制探討
        7.1 針刺對(duì)CFS模型大鼠NK細(xì)胞mi R-34a-5p的影響
        7.2 針刺對(duì)CFS模型大鼠NK細(xì)胞ERK1/2、p ERK1/2 的影響
        7.3 抑制mi R-34a-5p/ERK/p ERK通路對(duì)針刺調(diào)節(jié)CFS模型大鼠NKCC作用的影響
結(jié)論
不足與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附件1：在讀期間公開發(fā)表的學(xué)術(shù)論文、專著及科研成果



本文編號(hào)：4019980