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慢病毒介導(dǎo)的TRPC4基因沉默犬內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)其功能影響的研究

發(fā)布時(shí)間:2024-12-27 03:07
  目的:牽張成骨(distraction osteogenesis,DO)是一種廣泛使用的手術(shù)技術(shù),可控的機(jī)械力間斷施加于斷裂骨端,以增強(qiáng)再生過程并在牽張間隙中誘導(dǎo)新骨形成。由于骨骼是高度血管化的器官,所以我們認(rèn)為血管新生的過程是骨形成過程中的重要組成部分。EPCs參與血管生成的過程受到促血管生成物質(zhì)及抑制血管生成物質(zhì)的調(diào)控。通過檢測(cè)TRPC的mRNA和蛋白,發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)的的血管內(nèi)皮細(xì)胞和完整的血管內(nèi)皮中表達(dá)各種類型的TRPC家族成員,其中TRPC4是TRPC家族的重要成員,主要存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞中,TRPC4參與的生理過程也主要集中于心血管系統(tǒng)。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用EPC作為種子細(xì)胞,構(gòu)建慢病毒載體介導(dǎo)的siRNA沉默TRPC4基因,篩選出沉默效果最佳的siRNA,將最佳沉默效果的慢病毒載體介導(dǎo)的siRNA轉(zhuǎn)染EPCs。研究TRPC信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在牽張區(qū)新生血管的相關(guān)分子調(diào)控過程,為進(jìn)一步闡明牽張成骨模式中的新生血管形成機(jī)制提供理論依據(jù)。方法:1.犬內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)體外分離培養(yǎng)及鑒定:取3周大健康雜種犬,于雙側(cè)脛骨穿刺抽取脛骨骨髓,采用密度梯度離心法結(jié)合特殊誘導(dǎo)培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)犬骨髓內(nèi)皮...

【文章頁數(shù)】:75 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
個(gè)人簡歷
摘要
ABSTRACT
前言
1.實(shí)驗(yàn)材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
3 結(jié)果
4 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
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本文編號(hào):4021043

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