天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

基于CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠

發(fā)布時(shí)間:2024-12-18 02:41
   目的應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)靶向敲除編碼小鼠T、B細(xì)胞的Rag2基因及編碼NK細(xì)胞的IL2rg基因,構(gòu)建T、B細(xì)胞及NK細(xì)胞聯(lián)合免疫缺陷小鼠。方法根據(jù)Genbank報(bào)道的Rag2及IL2rg基因序列,分別針對(duì)其外顯子設(shè)計(jì)25 bp左右的sgRNA并進(jìn)行合成,sgRNA退火后克隆入p X330載體。Rag2-sgRNA、IL2rg-sgRNA及Cas9重組質(zhì)粒體外轉(zhuǎn)錄為mRNA后顯微注射入BALB/c小鼠受精卵細(xì)胞,受精卵細(xì)胞移植到受體動(dòng)物獲得子代小鼠,首建鼠(F0)與野生型小鼠交配獲得F1代小鼠,突變的F1代小鼠互交后篩選F2代純合子小鼠。通過(guò)基因測(cè)序、流式細(xì)胞技術(shù)及接種人源性腫瘤細(xì)胞系方法檢測(cè)子代小鼠基因型和表型。結(jié)果成功構(gòu)建了Rag2-sgRNA、IL2rg-sgRNA重組質(zhì)粒并對(duì)其進(jìn)行了體外轉(zhuǎn)錄,mRNA顯微注射并移植后獲得57只F0小鼠。連續(xù)交配后,獲得F2代純合子小鼠。序列分析表明子代小鼠中IL2rg有兩個(gè)基因型,分別是10 bp和11 bp的缺失突變;而Rag2只有一個(gè)基因型,為8 bp的缺失突變。與野生型BALB/c小鼠相比,小鼠外周血中CD3、B220及NKp46...

【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 寡核苷酸合成及質(zhì)粒構(gòu)建
        1.2.2 體外轉(zhuǎn)錄
        1.2.3 mRNA顯微注射及受精卵細(xì)胞移植
        1.2.4 基因敲除小鼠品系建立及基因型鑒定
        1.2.5 流式細(xì)胞術(shù)鑒定小鼠表型
        1.2.6 腫瘤移植模型鑒定小鼠表型
2 結(jié)果
    2.1 質(zhì)粒構(gòu)建及RNA轉(zhuǎn)錄
    2.2 基因敲除小鼠品系的建立及基因型鑒定
    2.3 基因敲除小鼠表型鑒定
3 討論



本文編號(hào):4016924

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://sikaile.net/xiyixuelunwen/4016924.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶4062c***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要?jiǎng)h除請(qǐng)E-mail郵箱bigeng88@qq.com
毛片在线观看免费日韩| 少妇毛片一区二区三区| 少妇高潮呻吟浪语91| 日韩欧美精品一区二区三区| 欧美精品一区二区三区白虎| 国产欧洲亚洲日产一区二区| 国产精品欧美一区两区| 日韩精品综合福利在线观看| 国产麻豆成人精品区在线观看| 最好看的人妻中文字幕| 国产视频在线一区二区| 久久精品蜜桃一区二区av| 国产精品久久三级精品| 欧美国产在线观看精品| 色涩一区二区三区四区| 国产不卡视频一区在线| 五月婷婷六月丁香在线观看| 欧美日韩综合在线精品| 日本人妻丰满熟妇久久| 天堂热东京热男人天堂| 色婷婷在线视频免费播放| 亚洲av熟女国产一区二区三区站| 久久精品亚洲欧美日韩 | 亚洲色图欧美另类人妻| 偷拍美女洗澡免费视频| 丰满人妻熟妇乱又乱精品古代| 熟女高潮一区二区三区| 自拍偷拍福利视频在线观看| 国产欧美日韩视频91| 国产精品亚洲二区三区| 丁香七月啪啪激情综合| 精品人妻av区波多野结依| 国产精品久久精品毛片| 日本久久精品在线观看| 成人精品一区二区三区综合 | 亚洲一区二区三区在线中文字幕| 麻豆视传媒短视频在线看| 99久久国产精品亚洲| 激情丁香激情五月婷婷| 四季精品人妻av一区二区三区 | 亚洲国产av在线观看一区 |