間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一類非造血干細胞,不僅來源廣泛而且具有一定的可塑性以及可以誘導(dǎo)分化為不同類型的細胞,如成骨細胞和基質(zhì)細胞等。MSCs通過分化參與組織損傷修復(fù)的能力使其成為臨床上最具應(yīng)用前景的干細胞類型之一。近年來隨著研究的深入,人們發(fā)現(xiàn),MSCs不僅可以通過定向分化替代受損組織,而且還可以通過旁分泌作用參與損傷修復(fù)。肌腱損傷是臨床常見的疾病之一�；诟杉毎募‰鞊p傷修復(fù)研究表明,多種因素可以誘導(dǎo)干細胞向肌腱細胞定向分化,包括細胞因子、力學(xué)拉伸、共培養(yǎng)環(huán)境等。但是,雖然有報道表明MSCs旁分泌可促進多種組織的損傷修復(fù),但MSCs旁分泌作用是否參與肌腱損傷修復(fù)目前還未有報道。本文的主要研究目的是探究大鼠骨髓MSCs條件培養(yǎng)基(conditioned medium from rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,r MSCs-CM)對大鼠肌腱細胞增殖的影響以及信號分子ERK1/2(extracellular regulated protein kinases 1/2,ERK1/2)在...

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
1 緒論
    1.1 研究背景
        1.1.1 肌腱損傷病理學(xué)以及治療手段的限制
        1.1.2 骨髓間充質(zhì)干細胞的生物學(xué)特性
        1.1.3 MSCs旁分泌的提出
    1.2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        1.2.1 MSCs旁分泌因子影響細胞生物學(xué)行為的研究
        1.2.2 MSCs參與肌腱損傷修復(fù)的研究
    1.3 研究內(nèi)容
        1.3.1 課題研究的主要內(nèi)容
        1.3.2 研究目標
    1.4 實驗設(shè)計
    1.5 研究方法
        1.5.1 研究方法
    1.6 本課題的特色和創(chuàng)新之處
2 rMSCs和肌腱細胞的原代培養(yǎng)及鑒定
    2.1 引言
    2.2 實驗器材與試劑
        2.2.1 實驗儀器、材料、設(shè)備
        2.2.2 實驗試劑
        2.2.3 主要試劑配制
    2.3 實驗方法和步驟
        2.3.1 r MSCs的原代培養(yǎng)及傳代培養(yǎng)
        2.3.2 檢測r MSCs原代細胞表面抗原
        2.3.3 肌腱細胞的原代培養(yǎng)及傳代培養(yǎng)
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 r MSCs的形態(tài)觀察
        2.4.2 r MSCs表面抗原鑒定
        2.4.3 肌腱細胞的形態(tài)觀察
    2.5 討論
    2.6 本章小結(jié)
3 rMSC-CM促進肌腱細胞增殖及其分子機理
    3.1 引言
    3.2 實驗器材與試劑、設(shè)備
        3.2.1 實驗儀器與材料
        3.2.2 實驗試劑
        3.2.3 主要試劑配制
    3.3 實驗方法與步驟
        3.3.1 r MSCs-CM的收集
        3.3.2 細胞計數(shù)法檢測r MSCs-CM對肌腱細胞的增殖
        3.3.3 流式細胞術(shù)檢測肌腱細胞的細胞周期
        3.3.4 Western blot技術(shù)檢測肌腱細胞中ERK1/2 激活情況
    3.4 實驗結(jié)果
        3.4.1 r MSCs-CM對肌腱細胞增殖的影響
        3.4.2 r MSC-CM對肌腱細胞的細胞周期影響
        3.4.3 r MSC-CM激活ERK1/2 信號蛋白
        3.4.4 PD98059 對r MSCs-CM激活ERK1/2 的抑制情況
        3.4.5 PD98059 對r MSCs-CM促肌腱細胞增殖的影響
        3.4.6 PD98059 對肌腱細胞的細胞周期影響
    3.5 討論
    3.6 本章小結(jié)
4 結(jié)果與展望
    4.1 主要結(jié)論
    4.2 后續(xù)研究工作的展望
致謝
參考文獻
附錄：A. 作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文目錄



本文編號：4016313