本文關(guān)鍵詞：人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)淋巴細(xì)胞增殖的影響及致瘤性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本試驗(yàn)研究人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞(hAMSCs)在體內(nèi)、外條件下對(duì)淋巴細(xì)胞增殖的影響,并將hAMSCs接種到免疫缺陷小鼠皮下后,觀察hAMSCs致瘤情況,了解hAMSCs低免疫原性的可能機(jī)制,為干細(xì)胞臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。試驗(yàn)通過(guò)雙酶消化法即兩次胰蛋白酶和一次Ⅰ型膠原酶共同消化分離hAMSCs,運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光的方法進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定,確定獲得的細(xì)胞為hAMSCs，采用CCK-8的方法測(cè)定淋巴細(xì)胞活細(xì)胞數(shù)目,ELISA測(cè)定細(xì)胞上清液中干擾素-γ(IFN-γ)的表達(dá),研究體外條件下hAMSCs對(duì)刀豆素蛋白(ConA)引起異體淋巴細(xì)胞增殖和淋巴細(xì)胞分泌IFN-γ劑量的影響；將CCl4橄欖油混合液按體重比腹腔注射到小鼠體內(nèi)造小鼠肝損傷模型后,小鼠尾靜脈注射hAMSCs治療肝損傷,測(cè)定小鼠3d、7d、14d、21d、30d外周血中淋巴細(xì)胞量和血漿中IFN-γ水平變化；分別將5×106hAMSCs、5×106和1×107肝癌細(xì)胞(HepG2)皮下注射于免疫缺陷小鼠背部,觀察致瘤形成情況,50天后將腫瘤取出,HE染色進(jìn)行組織學(xué)觀察。研究結(jié)果顯示,運(yùn)用酶消化法分離培養(yǎng)hAMSCs,經(jīng)鑒定、檢測(cè)后,獲得了純度較高的hAMSCs。CCK-8法測(cè)定,5μg/mLConA能夠引起淋巴細(xì)胞發(fā)生增殖,與hAMSCs共培養(yǎng)72h后,淋巴細(xì)胞活細(xì)胞數(shù)目較ConA刺激增殖組活細(xì)胞數(shù)目顯著降低(P0.01),hAMSCs抑制效果明顯。ELISA測(cè)定1×105個(gè)hAMSCs對(duì)淋巴細(xì)胞抑制72h的培養(yǎng)液中IFN-γ分泌情況,共培養(yǎng)組培養(yǎng)液中IFN-γ分泌量顯著低于對(duì)照組(P0.01)。尾靜脈注射hAMSCs肝損傷小鼠治療后,與損傷組相比,治療組小鼠淋巴細(xì)胞數(shù)量有降低趨勢(shì)；治療組小鼠體內(nèi)血漿中IFN-γ含量隨著hAMSCs注入時(shí)間的延長(zhǎng)也顯著降低(P0.01)。50d內(nèi)hAMSCs組未見(jiàn)腫瘤形成,HepG2注射組均有瘤形成。測(cè)定注射hAMSCs組AFP、CEA指標(biāo),均為正常。
【關(guān)鍵詞】：人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞 肝癌細(xì)胞 淋巴細(xì)胞增殖 干擾素-γ 致瘤性
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-10
• 1 引言10-18
• 1.1 干細(xì)胞分類(lèi)及意義10
• 1.2 間充質(zhì)干細(xì)胞的研究進(jìn)展10-17
• 1.2.1 MSC的來(lái)源及定義10-11
• 1.2.2 MSC免疫學(xué)特點(diǎn)11
• 1.2.3 MSC對(duì)可溶性因子的作用11-16
• 1.2.4 MSC優(yōu)勢(shì)治療應(yīng)用16-17
• 1.3 試驗(yàn)的背景及意義17-18
• 2 試驗(yàn)研究18-41
• 2.1 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)體內(nèi)外淋巴細(xì)胞增殖的影響18-35
• 2.1.1 材料來(lái)源18-19
• 2.1.2 主要試劑與儀器19
• 2.1.3 方法19-24
• 2.1.4 試驗(yàn)結(jié)果24-33
• 2.1.5 討論33-34
• 2.1.6 小結(jié)34-35
• 2.2 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞致瘤性研究35-41
• 2.2.1 材料與方法35-36
• 2.2.2 試驗(yàn)結(jié)果36-40
• 2.2.3 討論40-41
• 2.2.4 小結(jié)41
• 3 結(jié)論41-42
• 致謝42-43
• 參考文獻(xiàn)43-49
• 作者簡(jiǎn)介49

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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本文編號(hào)：395635