磁性標(biāo)記胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞的最佳濃度篩選
發(fā)布時(shí)間:2023-11-17 17:37
目的探討超微超順磁性氧化鐵(USPIO)標(biāo)記人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞(hPMSCs)的最佳濃度區(qū)間,為實(shí)現(xiàn)其磁共振(MR)體內(nèi)動(dòng)態(tài)成像和臨床應(yīng)用提供基礎(chǔ)研究資料。方法分離培養(yǎng)hPMSCs,以多聚賴氨酸(PLL)為轉(zhuǎn)染劑,與不同濃度USPIO形成PLL-USPIO復(fù)合物,分別標(biāo)記hPMSCs并考察其標(biāo)記效率,檢測(cè)標(biāo)記后h PMSCs的存活率、增殖能力和凋亡率等生物學(xué)特性。結(jié)果普魯士藍(lán)染色均顯示細(xì)胞質(zhì)內(nèi)大量鐵顆粒存在,當(dāng)標(biāo)記濃度≥10μg·mL-1時(shí)標(biāo)記率均>95%;當(dāng)磁性標(biāo)記濃度為15、20和25μg·mL-1時(shí)hPMSCs存活率均低于對(duì)照組(P均<0.01);標(biāo)記濃度在25μg·mL-1內(nèi)時(shí)增殖能力與對(duì)照組比較在第1天、3天、5天差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05),培養(yǎng)至第7天標(biāo)記濃度為25μg·mL-1組的OD值低于對(duì)照組(P=0.047);各標(biāo)記細(xì)胞與未標(biāo)記細(xì)胞晚期凋亡率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05),早期凋亡率隨標(biāo)記濃度增加呈遞增趨勢(shì),標(biāo)記濃度≥15μg·mL-1時(shí)早期凋亡率高于對(duì)照組(P<0.05),在標(biāo)記濃度為20、25μg·mL-1總凋亡率高...
【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1 主要試劑
1.1.2 主要設(shè)備
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 PMSCs分離培養(yǎng)及表面標(biāo)記鑒定
1.2.2 PLL-USPIO制備及hPMSCs磁性標(biāo)記
1.2.3 普魯士藍(lán)染色計(jì)算鐵標(biāo)記率
1.2.4 臺(tái)盼藍(lán)染色液檢測(cè)細(xì)胞活力
1.2.5 CCK-8試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖能力
1.2.6 Annexin V-FITC/PI試劑盒檢測(cè)細(xì)胞凋亡率
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
2.1 hPMSCs表面標(biāo)記鑒定
2.2 磁性標(biāo)記hPMSCs形態(tài)觀察
2.3 磁性標(biāo)記hPMSCs普魯士藍(lán)染色率比較
2.4 不同濃度USPIO標(biāo)記組與對(duì)照組hPMSCs存活率比較
2.5 不同濃度USPIO標(biāo)記組與對(duì)照組hPMSCs增殖能力比較
2.6 不同濃度USPIO標(biāo)記組與對(duì)照組hPMSCs凋亡率比較
3 討論
本文編號(hào):3864580
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1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1 主要試劑
1.1.2 主要設(shè)備
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 PMSCs分離培養(yǎng)及表面標(biāo)記鑒定
1.2.2 PLL-USPIO制備及hPMSCs磁性標(biāo)記
1.2.3 普魯士藍(lán)染色計(jì)算鐵標(biāo)記率
1.2.4 臺(tái)盼藍(lán)染色液檢測(cè)細(xì)胞活力
1.2.5 CCK-8試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖能力
1.2.6 Annexin V-FITC/PI試劑盒檢測(cè)細(xì)胞凋亡率
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
2.1 hPMSCs表面標(biāo)記鑒定
2.2 磁性標(biāo)記hPMSCs形態(tài)觀察
2.3 磁性標(biāo)記hPMSCs普魯士藍(lán)染色率比較
2.4 不同濃度USPIO標(biāo)記組與對(duì)照組hPMSCs存活率比較
2.5 不同濃度USPIO標(biāo)記組與對(duì)照組hPMSCs增殖能力比較
2.6 不同濃度USPIO標(biāo)記組與對(duì)照組hPMSCs凋亡率比較
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