人胚胎干細(xì)胞(human Embryonic Stem Cells,hESCs)是一類具有多向分化能力及體外增殖能力的干細(xì)胞,因而hESC擁有巨大的臨床應(yīng)用前景。隨著干細(xì)胞相關(guān)研究的快速發(fā)展,干細(xì)胞的臨床轉(zhuǎn)化治療已在再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域占據(jù)了舉足輕重的地位。尤其是在許多常規(guī)手段無法解決的重大科學(xué)問題中,如脊髓損傷、癌癥、年齡相關(guān)性視網(wǎng)膜變性等疾病,干細(xì)胞治療取得了令人鼓舞的效果。隨著干細(xì)胞研究的深入與拓展,常規(guī)的二維細(xì)胞培養(yǎng)方式已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足現(xiàn)有的研究和臨床轉(zhuǎn)化需求。自然界中的細(xì)胞生存在三維的體內(nèi)環(huán)境中,而二維培養(yǎng)會束縛干細(xì)胞的生長與分化,因而干細(xì)胞分化獲得的功能細(xì)胞中,均存在著功能不健全的問題,如分化獲得的肝細(xì)胞酶表達水平,不如體內(nèi)獲得的原代肝細(xì)胞。因此,利用三維培養(yǎng)模式模擬體內(nèi)細(xì)胞生長環(huán)境,進行細(xì)胞的體外培養(yǎng)和分化已成為當(dāng)今主流趨勢。除此之外,移植一位患者,往往需要10⁹數(shù)量級的細(xì)胞。常規(guī)的干細(xì)胞制備手段,需要消耗大量的人力物力,這不僅將增加干細(xì)胞治療的成本,而且在制備過程中增加了污染風(fēng)險,干細(xì)胞制品批次間的穩(wěn)定性也會因技術(shù)人員技術(shù)水平的差異而變得不穩(wěn)定。3D培養(yǎng)方式...

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 人胚胎干細(xì)胞分離及培養(yǎng)研究進展
        1.1.1 多能干細(xì)胞的分類及定義
        1.1.2 人胚胎干細(xì)胞分離的研究歷史
        1.1.3 人胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)體系的發(fā)展
    1.2 干細(xì)胞臨床應(yīng)用的發(fā)展
    1.3 干細(xì)胞規(guī)�；囵B(yǎng)的發(fā)展
    1.4 研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗試劑
        2.1.2 實驗耗材
        2.1.3 實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 人胚胎干細(xì)胞2D復(fù)蘇、培養(yǎng)和傳代
        2.2.2 hESCs的懸浮培養(yǎng)、傳代、凍存和復(fù)蘇
        2.2.3 hESCs在細(xì)胞培養(yǎng)袋中的培養(yǎng)、傳代、凍存和復(fù)蘇
        2.2.4 懸浮培養(yǎng)的hESCs的鑒定
3 結(jié)果與分析
    3.1 建立hESCs在超低貼附培養(yǎng)皿中的懸浮培養(yǎng)體系
    3.2 hESCs懸浮培養(yǎng)體系的建立
    3.3 大規(guī)模懸浮培養(yǎng)的hESCs的鑒定
4 討論
5 結(jié)論
致謝
參考文獻
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號：3864237