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人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞源性小膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)方法的建立及其表型和功能的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2023-09-17 13:48
  目的建立人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(hiPSC)誘導(dǎo)分化為小膠質(zhì)細(xì)胞(hiMGL)的方法,研究hiMGL的表型及功能。方法按照本實(shí)驗(yàn)室前期建立的hiPSC向小膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化的方法,將健康老年人來源的外周血細(xì)胞重編程的hiPSC誘導(dǎo)分化為hiMGL。利用免疫熒光法檢測小膠質(zhì)細(xì)胞特異性表達(dá)蛋白TMEM119,Image Pro plus軟件分析TMEM119陽性細(xì)胞率;分別采用LPS 0.5,1,2,4 mg·L-1和H2O25,25,125,625μmol·L-1刺激hiMGL 24 h后,應(yīng)用CCK8法檢測細(xì)胞活力;采用中性紅檢測細(xì)胞的吞噬功能。結(jié)果hiMGL表達(dá)小膠質(zhì)細(xì)胞特異性表面標(biāo)記物TMEM119,hiMGLsTMEM119陽性率為78%。在LPS 0.5~4 mg·L-1刺激下,hiMGL細(xì)胞活力和吞噬能力與Control組相比均有升高,在LPS 2 mg·L-1刺激下活力上升最為明顯(P<0.05);在LPS 1,2 mg·L-1刺激下吞噬功能增強(qiáng)最為明顯(P<0.05)。在H2O25-125μmol·L-1刺激下,hiMGL細(xì)胞活力無明顯改變,吞噬功能增強(qiáng);在H2O2...

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