發(fā)布時間：2017-05-21 11:04

  本文關(guān)鍵詞：小鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元條件培養(yǎng)基促進MC3T3-E1增殖分化的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：觀察小鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元條件培養(yǎng)基對MC3T3-E1增殖與分化的影響,初步探討其分子機制。材料和方法：取新生24h以內(nèi)的小鼠進行大腦皮質(zhì)神經(jīng)元原代培養(yǎng),收集第7-10天的條件培養(yǎng)基,將其按不同比例：1：4、1：2、1：1、1.5：1、2：1、4：1加入MC3T3-E1的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞,分別培養(yǎng)到第1、2、4、7天采用MTT比色法檢測MC3T3-E1的增殖；將上述條件培養(yǎng)基按1：1、1：2加入MC3T3-E1的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞,采用流式細胞儀檢測MC3T3-E1的周期；激光共聚焦顯微鏡下觀察MC3T3-E1;通過酶標微板法檢測MC3T3-E1分泌的堿性磷酸酶；通過蛋白酶免疫印跡法檢測MC3T3-E1的COL I、OPN、 BMP-2的表達；采用茜素紅染色法檢測MC3T3-E1的礦化結(jié)節(jié)產(chǎn)生率。結(jié)果：(1)不同比例(1：4、1：2、1：1、1.5：1、2：1、4：1)的小鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元條件培養(yǎng)基對MC3T3-E1增殖的影響表現(xiàn)為先增高后降低的趨勢,比例為1：1時明顯促進MC3T3-E1的增殖,與對照組有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。流式細胞儀檢測出實驗組(1：1)的MC3T3-E1處于分裂期(S期+G2M期)的細胞比例增高,與對照組有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。激光共聚焦顯微鏡下觀察到實驗組MC3T3-E1細胞骨架熒光強度較高,經(jīng)ImageJ軟件計算熒光量,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)實驗組ALP和礦化結(jié)節(jié)產(chǎn)生率高于對照組(P0.05)。Western Blot結(jié)果顯示實驗組在第7天時COL I、BMP-2、OPN表達高于對照組(P0.05)。結(jié)論：小鼠大腦皮層神經(jīng)元所分泌的物質(zhì)對MC3T3-E1的增殖、分化有明顯的直接促進作用。
【關(guān)鍵詞】：大腦皮質(zhì)神經(jīng)元 條件培養(yǎng)基 Mc3T3-E1 增殖 分化
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R338
【目錄】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-7
• 第一章 前言7-11
• 1.1 大腦皮質(zhì)神經(jīng)元細胞7
• 1.2 成骨細胞7-9
• 1.3 神經(jīng)系統(tǒng)與骨組織改建的聯(lián)系9-10
• 1.4 選題依據(jù)與研究思路10-11
• 第二章 小鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元的原代培養(yǎng)與鑒定11-18
• 2.1 引言11
• 2.2 材料和方法11-14
• 2.2.1 材料和儀器11-12
• 2.2.2 實驗方法12-14
• 2.3 結(jié)果與討論14-16
• 2.4 小結(jié)16-18
• 第三章 小鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元條件培養(yǎng)基的配比及其對MC3T3-E1增殖的影響18-27
• 3.1 引言18
• 3.2 材料和方法18-21
• 3.2.1 材料和儀器18-19
• 3.2.2 實驗方法19-21
• 3.3 結(jié)果與討論21-25
• 3.4 小結(jié)25-27
• 第四章 小鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元條件培養(yǎng)基對MC3T3-E1分化及礦化的影響27-35
• 4.1 引言27
• 4.2 材料和方法27-31
• 4.2.1 材料和儀器27-28
• 4.2.2 實驗方法28-31
• 4.3 結(jié)果與討論31-34
• 4.4 小結(jié)34-35
• 第五章 結(jié)論35-36
• 參考文獻36-40
• 在學(xué)期間的研究成果40-41
• 致謝41

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本文編號：383435