目的應用一種基于數(shù)字全息顯微術的活細胞成像技術,監(jiān)測登革病毒(DENV)感染C6/36細胞過程中3D形態(tài)學變化,分析病毒吸附和釋放觸發(fā)的系列細胞形態(tài)改變方向及強度,通過不同血清型間變化差異為深入研究相關感染機制提供線索。方法 6孔板中接種不同密度的C6/36細胞,以確定全息細胞成像儀下最佳成像密度;隨后由28℃常規(guī)培養(yǎng)調(diào)節(jié)為37℃病毒培養(yǎng)條件,以分析培養(yǎng)環(huán)境改變對細胞狀態(tài)的影響;4個血清型DENV感染C6/36細胞,在孵育2 h和培養(yǎng)24 h期間分別設計5個觀察點;借助Holo Monitor M4全息細胞成像及分析系統(tǒng)記錄相應三維全息圖及相關形態(tài)學參數(shù)并應用軟件進行統(tǒng)計學分析。結果 4×10⁵接種量下,C6/36細胞全息圖顯示單個細胞三維形態(tài)表現(xiàn)統(tǒng)一,細胞面積、厚度和體積離散程度均最小(P<0.05),確定其為最佳成像密度;轉移至37℃、5%CO₂培養(yǎng)24 h后細胞厚度、面積和體積改變無顯著性差異(P>0.05);孵育和培養(yǎng)期間4個血清型DENV組細胞面積和體積增大表現(xiàn)一致,但孵育期間DENV1-4均表現(xiàn)細胞厚度減小不同,培養(yǎng)期...

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