目的應(yīng)用一種基于數(shù)字全息顯微術(shù)的活細(xì)胞成像技術(shù),監(jiān)測(cè)登革病毒(DENV)感染C6/36細(xì)胞過(guò)程中3D形態(tài)學(xué)變化,分析病毒吸附和釋放觸發(fā)的系列細(xì)胞形態(tài)改變方向及強(qiáng)度,通過(guò)不同血清型間變化差異為深入研究相關(guān)感染機(jī)制提供線索。方法 6孔板中接種不同密度的C6/36細(xì)胞,以確定全息細(xì)胞成像儀下最佳成像密度;隨后由28℃常規(guī)培養(yǎng)調(diào)節(jié)為37℃病毒培養(yǎng)條件,以分析培養(yǎng)環(huán)境改變對(duì)細(xì)胞狀態(tài)的影響;4個(gè)血清型DENV感染C6/36細(xì)胞,在孵育2 h和培養(yǎng)24 h期間分別設(shè)計(jì)5個(gè)觀察點(diǎn);借助Holo Monitor M4全息細(xì)胞成像及分析系統(tǒng)記錄相應(yīng)三維全息圖及相關(guān)形態(tài)學(xué)參數(shù)并應(yīng)用軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 4×10⁵接種量下,C6/36細(xì)胞全息圖顯示單個(gè)細(xì)胞三維形態(tài)表現(xiàn)統(tǒng)一,細(xì)胞面積、厚度和體積離散程度均最小(P<0.05),確定其為最佳成像密度;轉(zhuǎn)移至37℃、5%CO₂培養(yǎng)24 h后細(xì)胞厚度、面積和體積改變無(wú)顯著性差異(P>0.05);孵育和培養(yǎng)期間4個(gè)血清型DENV組細(xì)胞面積和體積增大表現(xiàn)一致,但孵育期間DENV1-4均表現(xiàn)細(xì)胞厚度減小不同,培養(yǎng)期...

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