雌激素上調(diào)三叉神經(jīng)節(jié)谷氨酰胺合成酶表達及其對偏頭痛大鼠模型的影響
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【摘要】:目的偏頭痛是一種以中年女性為高發(fā)人群的最常見的原發(fā)性頭痛,中國成年男女患病率分別為5.9%與12.8%。目前認為女性對偏頭痛的易感性主要與雌激素(主要是雌二醇)的周期性波動有關,然而具體機制尚不清楚。本研究通過卵巢切除術建立卵巢去勢大鼠模型,采用免疫熒光染色法和Western blot法檢測大鼠三叉神經(jīng)節(jié)(TG)內(nèi)衛(wèi)星膠質(zhì)細胞谷氨酰胺合成酶(GS)及谷氨酸轉(zhuǎn)運體(EAAT-1、EAAT-2)的表達變化,觀察雌激素對TG衛(wèi)星膠質(zhì)細胞谷氨酸代謝的影響。皮下注射硝酸甘油建立偏頭痛大鼠模型,檢測各組大鼠TG處c-fos的表達,給予GS抑制劑L-MSO,觀察GS對偏頭痛大鼠模型的影響。材料與方法1.成年雌性Wistar大鼠45只,隨機分成假手術組(Sham, N=15)、去勢組(OVX, N=15)、去勢+雌激素替代(OVX+E, N=15)。2.酶免疫法檢測各組大鼠血清中雌二醇濃度,驗證卵巢去勢模型是否成功。3.采用Western blot法和免疫熒光染色法分別檢測各組大鼠三叉神經(jīng)節(jié)谷氨酰胺合成酶的表達及其與衛(wèi)星膠質(zhì)細胞激活標志物膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)、谷氨酸轉(zhuǎn)運體的共表達。4.皮下給予硝酸甘油(GTN)建立偏頭痛大鼠模型,給予GS抑制劑或生理鹽水,觀察各組動物行為學變化,采用Western blot法檢測各組大鼠TG處c-fos的表達。結果1.與假手術組相比,卵巢切除術能顯著降低血清雌二醇水平,給予外源性雌激素能升高血清雌二醇水平(P0.05)。2.免疫熒光染色和Western blot結果顯示,與假手術組相比,去勢組TG衛(wèi)星膠質(zhì)細胞GS表達下調(diào)(P0.05),給予雌激素替代后GS表達與假手術組無明顯差異(P0.05)。3.動物行為學與Western blot結果顯示,與皮下注射生理鹽水組相比,皮下注射GTN能引起大鼠搔頭、舔毛、爬籠等行為學評分增高,并能引起大鼠三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元即刻早期基因c-fos表達增加(P0.05)。4.卵巢切除或者給予GS抑制劑,能增加硝酸甘油引起的行為學評分與三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元c-fos的表達(P0.05)。結論1.雌激素上調(diào)三叉神經(jīng)節(jié)衛(wèi)星膠質(zhì)細胞谷氨酰胺合成酶的表達,提示雌激素可能促進三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元-衛(wèi)星膠質(zhì)細胞間谷氨酸-谷氨酰胺代謝偶聯(lián)。2.雌激素調(diào)節(jié)偏頭痛大鼠模型中三叉神經(jīng)痛覺傳入神經(jīng)元的激活,提示雌激素可能參與偏頭痛的發(fā)病過程。3.調(diào)節(jié)三叉神經(jīng)節(jié)谷氨酸-谷氨酰胺代謝可能是雌激素影響偏頭痛發(fā)病的重要機制之一。
【關鍵詞】:雌激素 偏頭痛 三叉神經(jīng)節(jié) 谷氨酰胺合成酶 谷氨酸轉(zhuǎn)運體
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R747.2;R-332
【目錄】:
- 英漢縮略語名詞對照5-6
- 摘要6-9
- ABSTRACT9-12
- 前言12-13
- 1 材料與方法13-21
- 2 結果21-28
- 3 討論28-30
- 結論30-31
- 參考文獻31-33
- 文獻綜述33-38
- 參考文獻35-38
- 致謝38-39
- 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文目錄39
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