目的研究Rictor/m TORC2在睪丸血睪屏障形成、睪丸發(fā)育和精子發(fā)生中的作用及相關(guān)機(jī)制。方法采用Cre-lox P重組酶系統(tǒng),構(gòu)建睪丸支持細(xì)胞中rictor基因敲除小鼠。比較敲除鼠和對照鼠的生殖器官外觀和質(zhì)量。HE染色觀察睪丸和附睪的組織形態(tài)。采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測生精小管的細(xì)胞周期。采用免疫熒光技術(shù)檢測增殖蛋白（Ki-67）和分離酶蛋白的表達(dá)。采用免疫組化和Western blot技術(shù)檢測血睪屏障相關(guān)蛋白表達(dá)。結(jié)果相比對照鼠,敲除鼠的睪丸和附睪體積和重量都明顯變�。≒＜0.01）;敲除鼠的生精細(xì)胞中二倍體細(xì)胞顯著上升（P＜0.01）,單倍體細(xì)胞顯著下降（P＜0.01）,而四倍體細(xì)胞、Ki-67和分離酶蛋白無顯著差異;血睪屏障相關(guān)蛋白出現(xiàn)嚴(yán)重的位置錯(cuò)亂,而蛋白表達(dá)量不受影響。結(jié)論睪丸支持細(xì)胞中rictor基因的正常表達(dá),在血睪屏障結(jié)構(gòu)完整性維持和功能發(fā)揮以及精子正常發(fā)生中起著至關(guān)重要作用。 

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其繁殖
    1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基因型鑒定
    1.3 免疫組化/免疫熒光/蘇木素-伊紅染色 (IHC/IF/HE)
    1.4 蛋白免疫印跡 (Western blot)
    1.5 細(xì)胞周期檢測
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理與分析
2 結(jié)果
    2.1 rictor敲除鼠的敲除效果鑒定
    2.2 rictor敲除鼠的表型變化
    2.3 rictor敲除鼠的細(xì)胞周期檢測結(jié)果
    2.4 rictor敲除鼠的生精小管BTB變化
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]睪丸支持細(xì)胞連接結(jié)構(gòu)在精子發(fā)生過程的作用[J]. 黃瑞,朱偉杰.  生殖與避孕. 2013(03)



本文編號：3715036