目的:通過(guò)對(duì)穩(wěn)定表達(dá)抗?jié)h灘病毒鼠/人嵌合抗體的CHO細(xì)胞進(jìn)行馴化,檢測(cè)其抗體的表達(dá)情況,并對(duì)所表達(dá)抗體的生物學(xué)活性進(jìn)行初步鑒定。方法:將本課題組前期篩選得到的穩(wěn)定高表達(dá)細(xì)胞株1-D9進(jìn)行無(wú)血清馴化,使其適合懸浮培養(yǎng)后接種到搖瓶,通過(guò)調(diào)整不同的培養(yǎng)條件,每天檢測(cè)細(xì)胞的活率和抗體表達(dá)量,并對(duì)表達(dá)的抗體進(jìn)行生物學(xué)活性鑒定。結(jié)果:通過(guò)馴化得到了適合懸浮培養(yǎng)的CHO細(xì)胞株,其抗體表達(dá)量高,生產(chǎn)周期短;并優(yōu)化了其懸浮培養(yǎng)條件,表達(dá)的抗體經(jīng)鑒定其生物學(xué)活性穩(wěn)定。結(jié)論:優(yōu)化了抗?jié)h灘病毒鼠/人嵌合抗體表達(dá)條件,為下一步工業(yè)化生產(chǎn)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 

【文章來(lái)源】：生物技術(shù)通訊. 2016,27(06)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 貼壁細(xì)胞無(wú)血清馴化
    1.3 搖瓶培養(yǎng)
    1.4 懸浮細(xì)胞的傳代穩(wěn)定性和凍存穩(wěn)定性檢測(cè)
    1.5 嵌合抗體的純化及鑒定
    1.6 嵌合抗體的體外中和活性測(cè)定
2 結(jié)果
    2.1 貼壁細(xì)胞無(wú)血清馴化
    2.2 無(wú)血清培養(yǎng)基的篩選
    2.3 嵌合抗體表達(dá)量的測(cè)定
    2.4 懸浮適應(yīng)細(xì)胞的傳代和凍存穩(wěn)定性檢測(cè)
    2.5 嵌合抗體的純化
    2.6 SDS-PAGE和Western印跡檢測(cè)
    2.7 嵌合抗體的體外中和活性測(cè)定
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]CHO細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基的工藝優(yōu)化[J]. 蔣娟娟,任東升,段鑫,張艷.  天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā). 2016(04)



本文編號(hào)：3622049