研究目的:G蛋白參與的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)是生物體內(nèi)非常保守且重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。目前多數(shù)研究認(rèn)為G蛋白以G蛋白偶聯(lián)受體（GPCRs）的形式參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。我們課題組先前的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn),G蛋白抑制性α亞基1/3（Gαi1/3）以一種新的方式參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo),即Gαi1/3參與到表皮生長因子（EGF）及其受體EGFR和角質(zhì)細(xì)胞生長因子（KGF）及其受體KGFR激活下游AKT-mTORC1信號,并在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中起到關(guān)鍵作用。生長因子信號激活后,Gαi1/3與生長因子受體結(jié)合蛋白2（Grb2）相關(guān)結(jié)合蛋白1（Gab1）以及生長因子受體形成復(fù)合物,且在生長因子受體對Gab1的磷酸化過程中起到關(guān)鍵作用。BDNF是神經(jīng)系統(tǒng)中十分重要的營養(yǎng)因子,我們試圖探究Gαi1/3是否在BDNF及其受體TrkB激活的下游信號通路中起到重要作用,并初步探索Gαi1/3對小鼠行為表型的影響。研究方法:野生型（WT）和Gαi1/3雙敲除型（DKO）小鼠的胚胎成纖維細(xì)胞（MEFs）,Gαi1單敲除的MEF細(xì)胞,Gαi3單敲除的MEF細(xì)胞,野生型（WT）分別轉(zhuǎn)入干擾Gαi1和Gαi3表達(dá)的siRNA的MEF細(xì)胞,Gab1敲除的MEF細(xì)胞... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞及實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 實(shí)驗(yàn)器材及儀器
        1.3 實(shí)驗(yàn)藥品、試劑、抗體
        1.4 實(shí)驗(yàn)試劑制備
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 小鼠原代胚胎神經(jīng)元提取和培養(yǎng)
        2.2 MEF細(xì)胞傳代及細(xì)胞處理前鋪板
        2.3 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染（6 孔板）
        2.4 慢病毒穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株篩選
        2.5 Western Blot
        2.6 曠場實(shí)驗(yàn)（Open Field Test，OFT）
        2.7 懸尾實(shí)驗(yàn)（Tail Suspension Test，TST）
        2.8 強(qiáng)迫游泳（Forced Swimming Test, FST）
        2.9 高架十字迷宮試驗(yàn)（the Elevated Plus Maze, EPM）
        2.10 新環(huán)境進(jìn)食抑制實(shí)驗(yàn)(Novelty Suppressed Feeding Test, NSF)
        2.11 成年小鼠心臟灌流
        2.12 振動切片制備
        2.13 熒光免疫組織化學(xué)染色
        2.14 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié)果與分析
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間本人公開發(fā)表的論文
中英文縮略詞表
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Tropomyosin-related kinase B/brain derived-neurotrophic factor signaling pathway as a potential therapeutic target for colorectal cancer[J]. Hussein Akil,Aurélie Perraud,Marie-Odile Jauberteau,Muriel Mathonnet.  World Journal of Gastroenterology. 2016(02)



本文編號：3599045