第一部分PCNs攜載p ENTR-shBMP9的最佳質(zhì)量比及PCNs對HepG2細(xì)胞的毒性研究目的:探討PCNs攜載p ENTR-shBMP9的最佳質(zhì)量比及PCNs對HepG2細(xì)胞的毒性。方法:通過瓊脂糖凝膠電泳檢測PCNs攜載pENTR-shBMP9的最佳質(zhì)量比,通過CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測PCNs對HepG2細(xì)胞的毒性。結(jié)果:當(dāng)PCNs/pENTR-shBMP9質(zhì)量比達(dá)到60:1時(shí),吸收率達(dá)到100%,瓊脂糖凝膠電泳沒有觀察到多余的質(zhì)粒。處理48小時(shí)后,PCNs在HepG2細(xì)胞中具有最高的細(xì)胞毒性效應(yīng),然后在處理72小時(shí)后回到基線。在2μg/μl濃度下,Hep G2細(xì)胞存活率為97.7%,即使PCNs濃度為4μg/μl,48小時(shí)后,HepG2細(xì)胞存活率仍>85%（85.0±0.23%）,表明PCNs對Hep G2細(xì)胞毒性較低。結(jié)論:PCNs攜載pENTR-shBMP9的最佳質(zhì)量比為60:1,PCNs對HepG2細(xì)胞毒性較低。第二部分PCNs/p ENTR-sh BMP9轉(zhuǎn)染在Hep G2細(xì)胞中的生物學(xué)效率目的:探討PCNs/p ENTR-sh BMP9轉(zhuǎn)染在Hep G2細(xì)胞中的生物... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

PCNs對pENTR-shBMP9的負(fù)載能力和PCNs在HepG2細(xì)胞中的細(xì)胞毒性（A）當(dāng)PCNs/pENTR-shBMP9質(zhì)量比達(dá)到60：1時(shí)，凝膠電泳顯示的吸附率接近100％

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文pENTR-shBMP9 的轉(zhuǎn)染效率高于 lipofectamine 2000 / shBMP9。表明 PCNspENTR-shBMP9 在體外實(shí)驗(yàn)中的轉(zhuǎn)染效率較高，有可能用于治療代謝紊亂和 IR 的遞送效率較高。進(jìn) 步表明 PCNs 是 種潛在的體外基因介導(dǎo)體，為 BMP-9 在糖代謝平衡和改善胰島素抵抗的作用中提供新的介導(dǎo)載體。5 附圖

圖 2.2 PCNs/ pENTR-shBMP9 體外轉(zhuǎn)染的生物學(xué)效應(yīng)（A 和 B）PCNs / pENTR-shBMP9在不同質(zhì)量比下轉(zhuǎn)染 HepG2 細(xì)胞中 BMP-9 的 mRNA 表達(dá)水平（A）和蛋白質(zhì)水平（B）。（C 和 D）PCNs / pENTR-shBMP9 在不同時(shí)間轉(zhuǎn)染 HepG2 細(xì)胞中 BMP-9 的 mRNA 表達(dá)（C）和蛋白質(zhì)表達(dá)（D），*P< 0.05, **P<0.01。Fig2.2 Biological efficiency of pENTR-shBMP9 transfection using PCNs in vitro (A and B)The mRNA expression (A) and protein levels (B) of BMP-9 in HepG2 cells transfected byPCNs/ pENTR-shBMP9 in various mass ratios. (C and D) The mRNA expression (C) andprotein levels (D) of BMP-9 in HepG2 cells transfected by PCNs/ pENTR- shBMP9 indifferent times, *P < 0.05, **P <0.01.


本文編號：3583367