本文關(guān)鍵詞：抗人異麥芽糖酶卵黃抗體和蔗糖酶卵黃抗體的制備及其活性探討，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:制備抗人異麥芽糖酶卵黃抗體(I-Ig Y)和抗人蔗糖酶卵黃抗體(S-Ig Y),探討其對Ⅱ型糖尿病(T2DM)大鼠血糖的影響。方法:(1)抗人I-Ig Y和S-Ig Y的制備及鑒定:人異麥芽糖酶(ISO)和人蔗糖酶(SUC)作為抗原免疫產(chǎn)蛋雞,硫酸鈉水稀釋提取法分離純化雞Ig Y,BCA法測定蛋白含量,SDS-PAGE分析Ig Y純度,間接ELISA法檢測Ig Y的效價(jià),Western blot鑒定Ig Y的特異性;PNPG法測Ig Y對α-葡萄糖苷酶的體外抑制效果;ELISA法評價(jià)在不同溫度、不同p H、胃蛋白酶、胰蛋白酶的條件下Ig Y的穩(wěn)定性;灌胃BALB/c小鼠檢測Ig Y的毒性。(2)建立T2DM大鼠模型:高糖高脂飼料喂養(yǎng)的SD大鼠經(jīng)腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ),獲得T2DM大鼠模型。(3)抗人I-Ig Y和S-Ig Y對T2DM大鼠空腹血糖影響:正常組、T2DM模型對照組、抗人I-Ig Y干預(yù)組、抗人S-Ig Y干預(yù)組和阿卡波糖干預(yù)組連續(xù)灌胃4周,分別在第2、3、4周測定其空腹血糖(FBG)水平。(4)抗人I-Ig Y和S-Ig Y對T2DM大鼠糖耐量的影響:每組大鼠禁食不禁水12小時(shí)后,正常組灌胃葡萄糖溶液,模型對照組灌胃葡萄糖溶液和0.01mol/L PBS,抗人I-Ig Y組灌胃葡萄糖溶液和抗人I-Ig Y,抗人S-Ig Y組灌胃葡萄糖溶液和抗人S-Ig Y,阿卡波糖組灌胃葡萄糖溶液和阿卡波糖。分別于0、1、2小時(shí)后尾靜脈取血檢測血糖水平。結(jié)果:(1)硫酸鈉水稀釋提取法獲得的Ig Y含量高且蛋白雜帶較少,抗人I-Ig Y和S-Ig Y效價(jià)達(dá)1:12800,Western blot檢測結(jié)果表明兩種Ig Y均能與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合。(2)抗人I-Ig Y和S-Ig Y對α-葡萄糖苷酶的半抑制濃度值(IC50)分別為0.616mg/m L和0.537mg/m L。(3)抗人S-Ig Y相對于抗人I-Ig Y,其擁有較好的熱穩(wěn)定性、較好的酸堿穩(wěn)定性和相對較好的胃蛋白酶抵抗力,但對胰蛋白酶抵抗力較差,兩種Ig Y對BALB/c小鼠均沒有毒性。(4)T2DM大鼠建模成功;(5)與對照組相比,抗人S-Ig Y能降低T2DM大鼠的FBG含量(P0.05),抗人I-Ig Y和抗人S-Ig Y均能改善T2DM大鼠的糖耐量(P0.05)。結(jié)論:經(jīng)ISO和SUC作為抗原免疫產(chǎn)蛋雞收獲的抗人I-Ig Y和S-Ig Y均能改善T2DM大鼠的糖耐量,抗人S-Ig Y能降低T2DM的FBG水平。
【關(guān)鍵詞】：卵黃抗體 α-葡萄糖苷酶 異麥芽糖酶 蔗糖酶 Ⅱ型糖尿病 血糖
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R392
【目錄】：

• 中英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 1 材料與方法11-18
• 2 結(jié)果18-32
• 3 討論32-35
• 4 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 綜述40-49
• 參考文獻(xiàn)46-49
• 致謝49-50
• 作者簡介50

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 邵敏;王新穎;劉星;王燕;周鶴峰;葛正龍;;hISO基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在大腸桿菌中的表達(dá)及鑒定[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2016年01期

2 Wen-Pei Chen;Yan-Dong Wang;Yan Ma;Zi-Yang Zhang;Lu-Yun Hu;Jun-Li Lin;Bao-Qin Lin;;Danhong Huayu Koufuye combined with metformin attenuated diabetic retinopathy in Zucker diabetic fatty rats[J];International Journal of Ophthalmology;2015年06期

3 邵敏;王新穎;張青峰;牛憲立;王燕;周鶴峰;葛正龍;;人蔗糖酶蛋白在大腸桿菌的誘導(dǎo)表達(dá)與純化[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2015年12期

4 王新穎;周鶴峰;邵敏;;卵黃抗體在國內(nèi)外醫(yī)藥方面的研究現(xiàn)狀[J];中國人獸共患病學(xué)報(bào);2015年02期

5 劉瑞生;張洪波;薛掌林;張述斌;王必惠;;雞新城疫卵黃抗體提取方法篩選研究[J];國外畜牧學(xué)(豬與禽);2014年06期

6 李再新;李丙超;胡衛(wèi)東;唐文才;文倩;張智;;DNA疫苗及其在卵黃抗體制備中的應(yīng)用[J];四川理工學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2014年03期

7 索江華;張粟;;傳染性法氏囊卵黃抗體不同提取工藝的比較[J];鄭州牧業(yè)工程高等�？茖W(xué)校學(xué)報(bào);2014年02期

8 楊冬;劉舒;宋鳳瑞;劉志強(qiáng);;虎杖和大黃中α-葡葡萄糖苷酶抑制劑的超濾質(zhì)譜研究[J];分析化學(xué);2014年04期

9 段海龍;余曉東;鄧騖遠(yuǎn);楊憲;劉剛;王文文;和七一;;抗白唇竹葉青蛇毒卵黃抗體(IgY)的制備及其穩(wěn)定性研究[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2014年06期

10 游哲榮;馬臣杰;辛文文;楊浩;康琳;高姍;王景林;;抗A型肉毒毒素卵黃抗體的制備、純化及活性檢測[J];軍事醫(yī)學(xué);2014年03期

  本文關(guān)鍵詞：抗人異麥芽糖酶卵黃抗體和蔗糖酶卵黃抗體的制備及其活性探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：357036