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碳納米管/SYBR Green I熒光探針在沙門氏菌檢測(cè)中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2021-12-11 07:16
  納米晶體、納米管等無機(jī)材料具有特殊的結(jié)構(gòu)特征,在一些小分子(核酸或蛋白質(zhì))的檢測(cè)中顯示出很好的性能。單壁碳納米管(SWNTs)能夠與寡核苷酸的堿基通過π-π非共價(jià)鍵作用形成穩(wěn)定的狀態(tài)。同時(shí)SWNTs具有抗光漂白作用以及近紅外波長(zhǎng)的熒光特性?稍谏茖W(xué)研究中作為熒光探針的載體。本文以SWNTs為載體,借助熒光染料SYBR Green Ⅰ (SG)特殊的熒光性質(zhì),對(duì)沙門氏菌屬的兩種血清型鼠傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌進(jìn)行快速檢測(cè),主要展開以下兩個(gè)方面的工作:1.檢測(cè)含trps基因的鼠傷寒沙門氏菌。本研究方法利用熒光的淬滅和恢復(fù)對(duì)含trps基因的鼠傷寒沙門氏菌進(jìn)行檢測(cè),SWNTs對(duì)寡核苷酸(ssDNA)特異的結(jié)合作用和SG對(duì)核酸分子(包括ssDNA和dsDNA)特異的插入作用及極強(qiáng)靈敏性,建立一種快速檢測(cè)含trpS基因的鼠傷寒沙門氏菌的方法。在本檢測(cè)體系中,單獨(dú)存在的SG分子是幾乎不能產(chǎn)生熒光信號(hào)的。當(dāng)加入探針分子(ssDNA)后,由于SG和探針DNA的插入作用能夠檢測(cè)到SG的熒光信號(hào)(520nm)。隨后,SWNTs的加入,由于SWNTs選擇性的與探針DNA的非共價(jià)作用使得探針DNA分子與S... 

【文章來源】:湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 引言和文獻(xiàn)綜述
    1.1 沙門氏菌
        1.1.1 沙門氏菌的概述
        1.1.2 沙門氏菌的危害
        1.1.3 沙門氏菌的致病機(jī)制
    1.2 沙門氏菌的檢測(cè)方法
        1.2.1 以核酸為基礎(chǔ)的快速檢測(cè)方法
        1.2.2 核酸技術(shù)結(jié)合熒光技術(shù)實(shí)現(xiàn)低濃度的核酸檢測(cè)
    1.3 碳納米管及其作用機(jī)制
    1.4 本文的研究?jī)?nèi)容
第二章 碳納米管/SYBR GREEN Ⅰ探針檢測(cè)鼠傷寒沙門氏菌的研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)溶液配制
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 SWNTs對(duì)熒光的淬滅
        2.3.2 目標(biāo)DNA序列對(duì)熒光值的恢復(fù)
        2.3.3 檢測(cè)體系工作原理的研究
        2.3.4 檢測(cè)體系特異性的研究
        2.3.5 鼠傷寒沙門氏菌的高靈敏檢測(cè)
        2.3.6 凝膠電泳驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
    2.4 小結(jié)
第三章 碳納米管/SYBR GREEN Ⅰ探針檢測(cè)腸炎沙門氏菌的研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)溶液配制
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 DNA探針與SWNTs的共價(jià)聯(lián)接
        3.3.2 目標(biāo)DNA序列對(duì)熒光值的恢復(fù)
        3.3.3 高靈敏的檢測(cè)腸炎沙門氏菌的16SrRNA基因組
        3.3.4 高靈敏的檢測(cè)腸炎沙門氏菌的16SrRNA
    3.4 小結(jié)
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間撰寫、發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
附錄



本文編號(hào):3534243

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