目的探討三磷酸腺苷（Adenosine triphosphate,ATP）對骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs）向軟骨細胞分化的影響及其作用機制。方法取4～5周齡SD大鼠的BMSCs,體外培養(yǎng)至第3代。以PNPP法檢測不同濃度ATP（150μmol/L、300μmol/L、600μmol/L）及BBG（P2X7受體抑制劑）對BMSCs堿性磷酸酶表達的影響。采用RT-PCR和real time PCR法檢測ATP及BBG對BMSCs多個成軟骨誘導指標mRNA表達的影響。結(jié)果加入ATP后,BMSCs堿性磷酸酶表達明顯增加（P<0.05）,其中ATP濃度為150μmol/L和300μmol/L時堿性磷酸酶表達量最高（P<0.05）;多個成軟骨指標,如SOX6、SOX9及COL2A1等的表達水平提高（P<0.05）;加入P2X7受體抑制劑后,ATP對堿性磷酸酶的促進作用降低（P<0.05）,成軟骨指標SOX6、SOX9及COL2A1等的表達亦明顯減少（P<0.05）。結(jié)論一定濃度的ATP對BMSCs向軟骨細胞分化具有促進作用,可能是通過介導P2X7受體而發(fā)揮作用。 

【文章來源】：組織工程與重建外科雜志. 2019,15(06)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

BMSCs鏡下觀察及P2X7受體表達

不同濃度ATP處理BMSCs 3 d后，采用堿性磷酸酶試劑盒對BMSCs堿性磷酸酶表達情況的檢測結(jié)果顯示，ATP處理后BMSCs堿性磷酸酶表達顯著升高，其中ATP濃度為150μmol/L和300μmol/L時堿性磷酸酶表達量最高（P<0.05），兩種濃度組間對比無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。因此，后續(xù)研究均采用300μmol/L為ATP效應(yīng)濃度（圖2）。2.3 ATP對BMSCs成軟骨指標表達的影響

RT-PCR檢測ATP處理3 d后的BMSCs成軟骨指標，成軟骨誘導培養(yǎng)組為陽性對照。結(jié)果表明，ATP可促進多個成軟骨指標表達上升，但與陽性對照相比效果較弱（圖3）。2.4 BBG抑制ATP對BMSCs促分化作用

【參考文獻】：
期刊論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞的分化[J]. 陳亮,何少茹,莊建,鄭曼利,孫云霞,梁穗新,劉玉梅,孫新,陳曉博.  中國組織工程研究. 2013(27)



本文編號：3534055