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雙波長(zhǎng)微孔板賴(lài)氏法檢測(cè)人血漿丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶含量的方法學(xué)驗(yàn)證

發(fā)布時(shí)間:2021-12-11 04:42
  目的采用雙波長(zhǎng)(492 nm/630 nm)微孔板賴(lài)氏法檢測(cè)人血漿中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase, ALT)的含量,并對(duì)該方法進(jìn)行系統(tǒng)性的評(píng)價(jià)。方法按照ALT測(cè)定試劑盒的要求加樣,應(yīng)用雙波長(zhǎng)(492 nm/630 nm)微孔板賴(lài)氏法測(cè)定人血漿中的ALT含量,并對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)的專(zhuān)屬性、線性范圍、準(zhǔn)確度和精密度進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果專(zhuān)屬性分析結(jié)果顯示,血漿樣品與不同比例的抗凝劑混合,其中的ALT均能有效被檢出,回收率分別為100%、95%和90%;對(duì)28和150個(gè)單位丙酮酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行倍比稀釋5個(gè)梯度以制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,采用多項(xiàng)式對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行擬合,結(jié)果顯示丙酮酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液分別在9.375~150、1.75~28和1.75~150個(gè)單位范圍內(nèi)線性關(guān)系均良好,相關(guān)系數(shù)r均達(dá)到0.99以上;準(zhǔn)確度檢測(cè)結(jié)果顯示,已知含量的廠家質(zhì)控血清和國(guó)家能力驗(yàn)證樣品的實(shí)測(cè)值和理論值相比,回收率均在90%~110%之間;同一樣品,重復(fù)加樣18孔,重復(fù)性檢測(cè)結(jié)果變異系數(shù)(CV)為5.29%;兩位試驗(yàn)人員在不同日期對(duì)同一樣品重復(fù)測(cè)定6次,中間精密度檢測(cè)結(jié)果變異系數(shù)為5.49%。結(jié)論該檢測(cè)方法... 

【文章來(lái)源】:微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展. 2020,48(01)

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【部分圖文】:

雙波長(zhǎng)微孔板賴(lài)氏法檢測(cè)人血漿丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶含量的方法學(xué)驗(yàn)證


第一板加樣情況

情況,血液制品,能力驗(yàn)證,精密度


確認(rèn)血液制品生產(chǎn)用人血漿ALT賴(lài)氏法-微孔板測(cè)定的準(zhǔn)確性是否符合要求。選擇已知含量的質(zhì)控血清20160612和能力驗(yàn)證樣品(1671、1672、1673、1674、1675),每份樣品重復(fù)加樣3孔,計(jì)算CV,CV應(yīng)<10%;并將實(shí)測(cè)值與理論值比較,回收率應(yīng)在90%~110%。加樣位置見(jiàn)圖2。1.7 精密度

標(biāo)準(zhǔn)曲線,線性范圍,標(biāo)準(zhǔn)曲線,卡門(mén)


表2 線性范圍確認(rèn)檢測(cè)結(jié)果Tab.2 Confirmation test for linear range 丙酮酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液理論含量/卡門(mén)單位 A492 nm/630 nm 值 均值 CV/% 1 2 3 150 0.840 0 0.845 3 0.843 5 0.8429 0.32 75 0.652 2 0.650 3 0.650 7 0.651 1 0.15 37.5 0.520 0 0.515 0 0.516 7 0.517 2 0.49 18.75 0.452 3 0.457 3 0.449 0 0.452 9 0.92 9.375 0.420 0 0.415 8 0.418 3 0.418 0 0.51 28 0.493 7 0.497 5 0.496 8 0.496 0 0.41 14 0.438 3 0.437 5 0.437 1 0.437 6 0.14 7 0.410 4 0.407 3 0.405 7 0.407 8 0.59 3.5 0.388 1 0.391 2 0.391 1 0.390 1 0.45 1.75 0.379 9 0.380 2 0.380 7 0.380 3 0.112.3 準(zhǔn)確度

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雙波長(zhǎng)微板賴(lài)氏法檢測(cè)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶方法的優(yōu)化[J]. 郝春玉,葉小書(shū),袁攀,曾浪霞,牟嘉煒,何學(xué)新,段艷,張燕.  中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2017(02)
[2]ALT微量賴(lài)氏法中NaOH濃度的選擇與應(yīng)用[J]. 徐鶴新.  中國(guó)輸血雜志. 2004(04)
[3]微量滴定板改良賴(lài)氏試管法檢測(cè)血漿丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶[J]. 韓曉忠,宋青,耿鳳軍.  中國(guó)生化藥物雜志. 2004(01)
[4]雙波長(zhǎng)微板賴(lài)氏法自動(dòng)化檢測(cè)ALT的研究[J]. 邢培清,劉玉振,方建華,溫濤,李伍升.  河南醫(yī)學(xué)研究. 2002(04)



本文編號(hào):3534028

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