研究背景、目的:衣原體作為全球傳播廣泛的四大性傳染病之一,嚴(yán)重危害人類健康,目前無有效的治療手段和預(yù)防疫苗。探討宿主抗衣原體感染的免疫學(xué)機(jī)制、尋找發(fā)揮作用的關(guān)鍵因子,可為有效控制衣原體感染提供新理論。IL-27主要由抗原提呈細(xì)胞（APCs）產(chǎn)生,在微生物及其產(chǎn)物或其他特定免疫環(huán)境的刺激下,通過與IL-27R結(jié)合激活其下游信號分子影響宿主固有免疫和適應(yīng)性免疫應(yīng)答,在寄生蟲和細(xì)菌等感染性疾病中起重要調(diào)控作用。IL-27在宿主抗衣原體感染中的作用尚不清楚,本研究擬探討IL-27/IL-27R信號途徑在抗衣原體感染中的作用及其相關(guān)作用機(jī)制,為探討胞內(nèi)菌感染相關(guān)的免疫學(xué)機(jī)制以及臨床研制有效的抗衣原體疫苗提供新的理論依據(jù)。研究方法:首先,為了明確IL-27/IL-27R信號途徑是否參與宿主抗衣原體免疫應(yīng)答,取適齡（6-8周齡）,雌性,C57BL/6遺傳背景野生型（WT,wild type）小鼠呼吸道感染鼠型衣原體（Chlymydia muridarum,Cm）,感染后第0、3、7、14天處死小鼠,提取肺組織總RNA,逆轉(zhuǎn)為cDNA后進(jìn)行RT-PCR,檢測小鼠肺組織中IL-27（EBI3）及IL-2... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

衣原體感染小鼠肺組織IL-27和IL-27RmRNA的表達(dá)注釋：WT小鼠經(jīng)呼吸道感染1X103IFU沙眼衣原體小鼠肺炎菌株（Cm），于感染后不同時間點處死小鼠，取右側(cè)中葉肺組織提取總RNA并逆轉(zhuǎn)為cDNA，利用EBI3和WSX-1基因引物進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增，檢測IL-27（EBI3）及IL-27R

天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 結(jié)果2.1.2 IL-27R 基因敲除小鼠對衣原體呼吸道感染易感2.1.2.1 WSX-1-/-小鼠 Cm 感染體重顯著降低為了探討 IL-27/IL-27R 在衣原體感染中的作用，我們使用一定劑量的 Cm 經(jīng)呼吸道感染 IL-27R 基因敲除小鼠（WSX-1-/-）和 WT 小鼠，圖 2 顯示兩組小鼠感染后體重變化存在顯著差異。Cm 感染的 WSX-1-/-小鼠與 WT 小鼠相比，外形越發(fā)瘦削，可見豎毛現(xiàn)象，活動量明顯減少。我們監(jiān)測小鼠在每日清晨時的體重并制作其體重變化曲線，在感染后第 3 天，兩組小鼠的體重均開始下降，于感染后第 7 天，WT 小鼠體重降至最低點，隨后逐漸恢復(fù)，但 WSX-1-/-小鼠體重持續(xù)降低，且于感染后第 11 天至第 14 天，與 WSX-1-/-小鼠比較顯示顯著統(tǒng)計學(xué)差異（*, p<0.05; ***, p<0.001）。結(jié)果提示，IL-27R 基因缺失小鼠 Cm 感染體重顯著降低。

WSX-1-/-小鼠肺組織 IFU 于感染后第 14 天高于 WT 小鼠，差異有顯著性（*, p < 0.05）（圖3B）。結(jié)果提示， IL-27R 基因缺失小鼠衣原體在感染肺組織大量繁殖。圖 3 衣原體感染 WT 和 IL-27R 基因敲除小鼠肺組織衣原體繁殖注釋：一定劑量的衣原體呼吸道感染 WT 和 WSX-1-/-小鼠，感染后不同時間點處死小鼠，取左側(cè)肺組織制備肺組織勻漿，取上清液感染處于對數(shù)生長期的 Hela

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]內(nèi)源性IL-17誘導(dǎo)MIP-2與IL-6表達(dá)在衣原體肺炎中促進(jìn)中性粒細(xì)胞循環(huán)[J]. 張乃紅,湯曉菲,邢冬紅,王兆娥,王海萍,黃煥軍,白虹.  醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志. 2010 (03)



本文編號：3497535