樹鼩腺病毒（Tree Shrew Adenovirus,TAV）是一種線性雙鏈DNA病毒,屬于腺病毒科,哺乳動(dòng)物腺病毒屬。腺病毒感染會(huì)引起急性上呼吸道感染、急性結(jié)膜炎、急性出血性膀胱炎、腹瀉等疾病。樹鼩（Tupaia belangeri）作為與靈長類動(dòng)物親緣關(guān)系最近的新型模式動(dòng)物,與人類及靈長類動(dòng)物較高的遺傳同源性,在人類疾病模型尤其是感染性疾病模型和臨床前藥物開發(fā)研究中發(fā)揮著不可或缺的作用,已逐步成為生物醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。前期開展的相關(guān)研究表明,野生來源樹鼩中腺病毒核酸檢測率較高,并有疑似病例發(fā)生,因此被列為該動(dòng)物微生物質(zhì)量控制的檢測指標(biāo)之一,但迄今國內(nèi)還未見成功分離的報(bào)道。本研究從樹鼩偶發(fā)呼吸道疾病及腹瀉臨床癥狀推測可能是由某種病毒感染引起,采用病毒分離方法首次從樹鼩這一物種分離鑒定到樹鼩腺病毒。為揭示這株TAV在腺病毒家族中所處的進(jìn)化地位、遺傳信息以及對樹鼩健康是否存在潛在威脅,本研究對所獲得的TAV進(jìn)行了全基因組序列解析。首先,對來自患有嚴(yán)重呼吸道疾病的樹鼩氣管及肺組織樣品進(jìn)行病理學(xué)檢測及樣品處理,通過樹鼩原代腎細(xì)胞（Tree Shrewkidney cells,TKC）培養(yǎng),產(chǎn)... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３腺病毒復(fù)制周期簡圖??

中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院碩士研究生畢業(yè)論文??⑦將濾柱置于新的罔心管中，室溫１２０００ｒｐｍ離心ｌｍｉｎ。??⑧將濾柱安置于新的１．５ｍＬ離心管中，在濾柱膜中央加入３０｜ｉＬ?ＤＥＰＣ水，??室溫靜置ｌｍｉｎ。室溫１２０００ｒｐｍ離心ｌｍｉｎ洗脫ＤＮＡ。??純化得到的ＤＮＡ產(chǎn)物由寶生物（大連）工程公司測序，測序結(jié)果于ＮＣＢ１??ＢＬＡＳＴ進(jìn)行序列相似性和同源性分析，以確定ＰＣＲ檢測的準(zhǔn)確性。??２．實(shí)驗(yàn)結(jié)果??２．１樹駒肺組織病理學(xué)病變特征觀察??病毒性肺炎主要表現(xiàn)為肺間質(zhì)的炎癥。肉眼觀，病變常不明顯。病變區(qū)域呈??暗紅色，肺體積增大（圖４）。??

２．２樹駒原代腎細(xì)胞ＴＫＣ和ＣＫ１８的鑒定??酶消化法所得腎細(xì)胞于１２ｈ貼壁，２４小時(shí)細(xì)胞從片斷和團(tuán)塊周邊貼壁生長，４８??小時(shí)細(xì)胞鋪滿瓶底，細(xì)胞呈扁平不規(guī)則多角形，鵝卵石樣排列（圖６）。傳代后１２ｈ??細(xì)胞開始貼壁，２４小時(shí)完全貼壁。??＿??圖６樹駒原代腎細(xì)胞（１０〇ｘ）??Ｆｉｇ．６?Ｔｒｅｅ?ｓｈｒｅｗ?ｋｉｄｎｙ?ｃｅｌｌｓ?（１０〇ｘ）．??用優(yōu)化的培養(yǎng)條件對分離得到的樹駒原代腎細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)第４天，可在顯微??２６??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[3]兒童急性呼吸道感染病毒流行特征與基因特征研究[D]. 盧慶彬.山東大學(xué) 2013
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[5]Ⅰ群禽腺病毒的分離鑒定和生物學(xué)特性研究及重組禽腺病毒的構(gòu)建[D]. 張明明.揚(yáng)州大學(xué) 2008

碩士論文
[1]禽腺病毒熒光定量PCR檢測方法的建立與初步應(yīng)用[D]. 邱麗葉.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]熒光定量PCR快速檢測登革1型病毒[D]. 熊建英.南方醫(yī)科大學(xué) 2012
[3]靶向腫瘤細(xì)胞的腺病毒纖毛蛋白改造研究[D]. 陳亞龍.浙江理工大學(xué) 2010



本文編號：3453075