HIV-1感染靶細(xì)胞需要Env蛋白與第受體CD4和其它多種輔助受體的介導(dǎo)作用，通過(guò)蛋白復(fù)合物的系列分子構(gòu)象的改變，幫助完成病毒與細(xì)胞的膜融合過(guò)程，從而開(kāi)始病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制增殖，除廣泛應(yīng)用的CCR5和CXCR4輔助受體，已經(jīng)確認(rèn)和證實(shí)十余種其它輔助受體。CCR5和CXCR4作為HIV-1主要利用的輔助受體，其結(jié)合的功能區(qū)已很清楚，但其它輔助受體的功能區(qū)并不明了。目前知道gp120V3區(qū)與細(xì)胞嗜性轉(zhuǎn)換有關(guān)，靜電荷數(shù)、糖基化、關(guān)鍵位置的氨基酸突變等因素均可影響著HIV-1對(duì)CCR5和CXCR4的利用情況。GPR15作為輔助受體的員，可與HIV-1、HIV-2和SIV病毒結(jié)合并介導(dǎo)感染，但其在感染中所起到的作用并沒(méi)有引起足夠的重視，因?yàn)橐酝l(fā)現(xiàn)的病毒不僅可以應(yīng)用GPR15輔助受體，更主要的是應(yīng)用輔助受體CCR5和/或CXCR4，這樣GPR15輔助受體在HIV感染中的作用被主要的輔助受體所掩蓋，對(duì)于V3區(qū)與GPR15輔助受體的相互作用機(jī)理更是鮮有報(bào)道。目前，已經(jīng)初步探明GPR15輔助受體的天然功能以及在HIV機(jī)體感染中的作用。GPR15蛋白廣泛表達(dá)于腸道細(xì)胞中，能夠特異地控制T細(xì)胞歸巢，尤... 

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【文章頁(yè)數(shù)】：106 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 病毒包膜糖蛋白（Env 蛋白）的研究現(xiàn)狀
        1.1.1 HIV-1 簡(jiǎn)介
        1.1.2 Transmitted/Founder HIV-1 簡(jiǎn)介
        1.1.3 病毒包膜糖蛋白（Env 蛋白）
        1.1.4 V3 區(qū)的功能及性質(zhì)
    1.2 輔助受體功能及與 Env 蛋白 V3 區(qū)相互作用研究現(xiàn)狀
        1.2.1 輔助受體的發(fā)現(xiàn)與功能
        1.2.2 輔助受體與 Env 蛋白 V3 區(qū)相互作用
    1.3 ZP6248 病毒與 GPR15 輔助受體
        1.3.1 ZP6248 病毒的發(fā)現(xiàn)及特殊性質(zhì)
        1.3.2 ZP6248 病毒的 V3 區(qū)
        1.3.3 GPR15 輔助受體的發(fā)現(xiàn)及免疫學(xué)功能
        1.3.4 GPR15 輔助受體介導(dǎo) HIV 感染研究現(xiàn)狀
    1.4 HIV-1 病毒輔助受體嗜性研究現(xiàn)狀及臨床意義
        1.4.1 HIV-1 病毒輔助受體嗜性機(jī)理研究現(xiàn)狀
        1.4.2 HIV-1 病毒輔助受體嗜性機(jī)理研究的臨床意義
        1.4.3 ZP6248 病毒 GPR15 輔助受體嗜性研究臨床意義
    1.5 立題依據(jù)
        1.5.1 研究意義
        1.5.2 擬解決問(wèn)題
        1.5.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 菌株、細(xì)胞、質(zhì)粒
        2.1.2 抗體
        2.1.3 引物
        2.1.4 基因合成
        2.1.5 主要試劑
        2.1.6 常規(guī)試劑
        2.1.7 儀器與設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.3 蛋白的表達(dá)和鑒定
        2.2.4 細(xì)胞 RNA 的提取
        2.2.5 逆轉(zhuǎn)錄 PCR
        2.2.6 熒光實(shí)時(shí)定量 PCR
        2.2.7 穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系的構(gòu)建和篩選
        2.2.8 細(xì)胞存活率檢測(cè)
        2.2.9 細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
    3.1 HIV V3 區(qū)與 GPR15 輔助受體嗜性研究
        3.1.1 質(zhì)粒的構(gòu)建
        3.1.2 HIV-1 病毒的包裝和檢測(cè)
        3.1.3 HIV-1 病毒的輔助受體嗜性檢測(cè)
        3.1.4 GPR15 嗜性病毒的細(xì)胞毒性檢測(cè)
        3.1.5 V3 區(qū)靜電荷與病毒 GPR15 嗜性
        3.1.6 討論
        3.1.7 小結(jié)
    3.2 GPR15 各胞外區(qū)與 ZP6248 病毒相互作用研究
        3.2.1 質(zhì)粒的構(gòu)建
        3.2.2 GPR15/CCR5 瞬時(shí)表達(dá)體系介導(dǎo) ZP6248 病毒感染研究
        3.2.3 GPR15/CCR5 穩(wěn)定表達(dá)體系介導(dǎo) ZP6248 病毒感染研究
        3.2.4 GPR15/CCR5 嵌合輔助受體與 ZP6248 Env 相互作用研究
        3.2.5 討論
        3.2.6 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡(jiǎn)歷
致謝



本文編號(hào)：3443318