腸道病毒71型（EV71）是引起嬰幼兒手足口病的一種重要病原病毒,其屬于小RNA病毒科,腸道病毒屬（Enterovirus）成員,是一種無囊膜的正鏈RNA病毒。EV71病毒基因組大小約為7400個(gè)核苷酸,編碼4個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白和7個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白,在EV71病毒感染過程中,時(shí)常會(huì)誘導(dǎo)宿主細(xì)胞凋亡進(jìn)而抑制病毒的復(fù)制。而另一方面,EV71病毒會(huì)激活宿主細(xì)胞的抗凋亡通路,比如PI3K/Akt信號(hào)通路,抑制細(xì)胞凋亡而幫助病毒完成生命周期。然而截至目前,在EV71病毒感染過程中,細(xì)胞凋亡和PI3K/Akt信號(hào)通路的相互作用關(guān)系尚不清楚。因而本研究綜合運(yùn)用Western Blot、免疫熒光技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)、免疫共沉淀技術(shù)、基因沉默、藥物阻斷等實(shí)驗(yàn)方法,系統(tǒng)研究EV71病毒感染對(duì)PI3K/Akt通路的影響;EV71病毒感染對(duì)線粒體細(xì)胞色素C釋放的影響;EV71病毒感染對(duì)細(xì)胞質(zhì)Bax蛋白遷移轉(zhuǎn)運(yùn)的影響;EV71病毒感染對(duì)JNK介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的影響;EV71感染細(xì)胞后,PI3K/Akt通路對(duì)細(xì)胞凋亡的影響;以及EV71病毒感染后,PI3K/Akt對(duì)JNK通路的影響,最終闡明EV71病毒激活PI3K/Akt信號(hào)通路抑... 

【文章來源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 手足口病
    1.2 腸道病毒71型
    1.3 EV71病毒顆粒結(jié)構(gòu)
    1.4 EV71病毒基因組結(jié)構(gòu)
    1.5 EV71病毒基因分型
    1.6 EV71病毒復(fù)制
    1.7 應(yīng)激顆粒參與EV71病毒復(fù)制與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
    1.8 EV71激活PI3K/Akt信號(hào)通路
    1.9 研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 細(xì)胞與病毒
        2.1.2 抗體和抑制劑
        2.1.3 主要儀器和耗材
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 SiRNA和瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
        2.2.2 亞細(xì)胞成分的分離
        2.2.3 免疫共沉淀和Western Blot分析
        2.2.4 免疫熒光檢測(cè)
        2.2.5 流式細(xì)胞術(shù)分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 EV71病毒感染激活RD細(xì)胞PI3K/Akt通路
    3.2 EV71病毒感染誘導(dǎo)細(xì)胞色素C的釋放
    3.3 EV71病毒感染誘導(dǎo)Bax蛋白的轉(zhuǎn)位和活化
    3.4 JNK激活促進(jìn)EV71病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡
    3.5 抑制PI3K/Akt通路增強(qiáng)細(xì)胞凋亡
    3.6 PI3K/Akt通路通過促進(jìn)磷酸化ASK1而抑制JNK通路的激活
4 討論
    4.1 抑制凋亡模式圖
    4.2 抑制凋亡分析
    4.3 總結(jié)
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
個(gè)人簡歷



本文編號(hào)：3421527