發(fā)布時間：2021-10-07 07:05

　　空腸彎曲菌是革蘭氏陰性微需氧細菌,是引起人類腸道疾病最常見的病原菌之一。近年來,由于抗生素的濫用,空腸彎曲菌對抗生素的耐藥性一直在持續(xù)增強。世界衛(wèi)生組織已將空腸彎曲菌列為重要的抗生素耐藥細菌,迫切需求新型抗菌制劑。噬菌體是一種細菌病毒,它可以特異性識別并感染宿主細菌,在其體內(nèi)大量復(fù)制,最終裂解殺死宿主菌。與抗生素相比,噬菌體產(chǎn)品具有使用簡便、特異性強、增殖迅速、抗菌能力強等許多優(yōu)點。本研究從雞糞便和污水樣品中分離篩選空腸彎曲菌噬菌體,鑒定噬菌體基礎(chǔ)生物學(xué)特性和基因組特性。并探索空腸彎曲菌噬菌體最佳應(yīng)用條件,初步評價噬菌體對空腸彎曲菌的消減效果。一、空腸彎曲菌噬菌體的分離和篩選以空腸彎曲菌NCTC11168為宿主菌,采用雙層平板法,從1480份雞糞便樣品和污水樣品中檢測出244份陽性樣品,其中糞便樣品陽性率19.69%（189/960）,污水樣品陽性率10.58%（55/520）。經(jīng)過篩選和純化后,獲得45株寬裂解譜空腸彎曲菌噬菌體。不同樣品中噬菌體分離率和裂解譜差異明顯,糞便樣品（19.69%）噬菌體分離率高于污水樣品（10.58%）,但污水源噬菌體裂解能力強于糞便源噬菌體;活禽市場雞... 

【文章來源】：揚州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２噬菌體裂解譜測定??Ｆｉｇ?１－２?Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐｈａｇｅ?ｌｙｔｉｃ?ｐｒｏｆｉｌｅｓ??

從污水中分離出一株空腸彎曲菌卩蜜菌體，命名為ＣＰ３９?兩??株嗟菌體的噬菌斑形態(tài)相似，直徑約為１－２?ｍｍ，清晰透明，邊緣光滑，無暈環(huán)。詳見圖２－??Ｌ』Ｌ?Ｊ??圖２－１空腸彎曲菌噬菌體ＣＰ７和ＣＰ３９噬菌斑??Ｆｉｇ?２－１?Ｐｌａｑｕｅｓ?ｏｆ?Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ?ｊｅｊｕｎｉ?ｐｈａｇｅｓ?ＣＰ７?ａｎｄ?ＣＰ３９??３．１嗤菌體效價??菌體ＣＰ７和ＣＰ３９的效價均為１?Ｘ?ｌ〇１Ｑｐｆｕ／ｍｌ，表明兩株噬菌體裂解性較好，可以用于??進行后續(xù)實驗。詳見表２－１。??表２－１噬菌體ＣＰ７和ＣＰ３９的效價??Ｔａｂｌｅ?２－１?Ｔｈｅ?ｔｉｔｅｒ?ｏｆ?ｐｈａｇｅｓ?ＣＰ７?ａｎｄ?ＣＰ３９??Ｐｈａｇｅ?Ｔｉｔｅｒ??ＣＰ７?ｌＸ１０１０ｐｆｕ／ｍｌ???ＣＰ３９?ｌＸ１０１０ｐｆｕ／ｍｌ??３．２噬菌體裂解譜??噬菌體ＣＰ７和ＣＰ３９對大腸埃希菌、宋內(nèi)志賀菌、腸炎沙門氏菌和雞白痢沙門菌都不??具有裂解能力，表明噬菌體ＣＰ７和ＣＰ３９具有很強的特異性。對９０株空腸彎曲菌分離株的??裂解能力測定結(jié)果表明，噬菌體ＣＰ７能裂解４１株空腸彎曲菌（４５．５６％），噬菌體ＣＰ３９能??裂解４８株空腸彎曲菌（５３．３３％），雖然兩株噬菌體的裂解率差異不大，但是噬菌體ＣＰ７和??ＣＰ３９裂解譜差異較大，同時也具有一定范圍的交叉。詳見表２－２。??

Ｔｉｍｅ／ｍｉｎ?Ｔｉｍｅ／ｍｉｎ??圖２－３噬菌體ＣＰ７和ＣＰ３９溫度耐受曲線??Ｆｉｇ?２－３?Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ?ｏｆ?ｐｈａｇｅ?ＣＰ７?ａｎｄ?ＣＰ３９?ｔｏ?ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ??３．６嗤菌體ｐＨ穩(wěn)定性??噬菌體ＣＰ７和ＣＰ３９對ｐＨ耐受性較強，在ｐＨ?６－８范圍內(nèi)效價較穩(wěn)定，ｐＨ值小于６或??大于８都會引起效價的明顯下降，但在ｐＨ值為３的強酸和１２的強堿環(huán)境中仍具有較高效??價，ｐＨ＜３或＞１２時，基本檢測不到噬菌體。詳見圖２－４。??１勹?、ｍ?＂１??一?２?／?＼?ＣＰ３９??Ｉｓ－?１?＂?＾??Ｉ?＂?１?４．?／??ｕ－??－??６?Ｉ?？?■?ｉ?ｉ?■?ｉ?■?■?ｉ?■?ｉ?■?〇?■?ｉ?？?ｉ?ｉ?Ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?．?１??０?１５?３０?４５?６０?７５?９０?１０５?１２０?１３５?１５０?１６５?１８０?〇?ｊ?２?３?４?５?６?７?８?９?１０?１１?１２?１３?１４??Ｔｉｍｅ／ｍｉｎ?ｐＨ??圖２－２噬菌體ＣＰ７和ＣＰ３９的一步生長曲線?圖２－４噬菌體ＣＰ７和ＣＰ３９的ｐＨ耐受曲線??Ｆｉｇ?２－２?Ｏｎｅ－ｓｔｅｐ?ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅｓ?ｏｆ?ｐｈａｇｅ?ＣＰ７?ａｎｄ?ＣＰ３９?Ｆｉｇ?２－４?Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ?ｏｆ?ｐｈａｇｅ?ＣＰ７?ａｎｄ?ＣＰ３９?ｔｏ?ｐＨ??３．７噬菌體形態(tài)鑒定??經(jīng)透射電鏡觀察，嗤菌體ＣＰ７和ＣＰ３９均有一正多面體對稱頭部，頭部直徑８０?ｎｍ，??有一長約１００ｎｍ、寬１５ｎｍ的尾部

【參考文獻】：
期刊論文
[1]空腸/結(jié)腸彎曲菌噬菌體分型的研究[J]. 林發(fā)榕,王恩澤,王煥妞.  微生物學(xué)報. 1986(04)
[2]結(jié)腸彎曲菌噬菌體的分離及其特性的研究[J]. 林發(fā)榕,王恩澤,郭玉華,張素娟.  江蘇醫(yī)藥. 1984(10)



本文編號：3421581