發(fā)布時間：2021-09-12 20:32

　　目的:采用經(jīng)典離體動物癲癇模型,即無鎂細(xì)胞外液孵育神經(jīng)元導(dǎo)致異常放電,模擬癲癇發(fā)作過程,觀察鈣敏感受體（calcium-sensing receptor,CaSR）在無鎂細(xì)胞外液共同孵育神經(jīng)元與心肌細(xì)胞中的表達(dá)變化,探討CaSR在無鎂細(xì)胞外液孵育神經(jīng)元與心肌細(xì)胞中的表達(dá)及與絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated potein kinase,MAPK）通路的關(guān)系。方法:采用無鎂細(xì)胞外液孵育神經(jīng)元與心肌細(xì)胞,用模擬缺血培養(yǎng)液培養(yǎng)3小時后,更換為正常DMEM培養(yǎng)液常規(guī)培養(yǎng)6小時的方法建立新生大鼠神經(jīng)元與心肌細(xì)胞共培養(yǎng)癲癇模型。利用MTT比色法、HE染色和透射電鏡檢測神經(jīng)元與心肌細(xì)胞存活率和形態(tài)變化;Western blot等方法觀察CaSR蛋白的表達(dá)。以精胺（CaSR的激動劑）和calhex231（CaSR的抑制劑）作為干預(yù)因素,Western blot檢測MAPK通路的蛋白表達(dá),觀察CaSR在無鎂細(xì)胞外液孵育神經(jīng)元與心肌細(xì)胞中的表達(dá)及MAPK通路在其中的作用。結(jié)果:經(jīng)HE染色、透射電鏡結(jié)果顯示對照組神經(jīng)元與心肌細(xì)胞胞體完整,細(xì)胞膜無破損,完整性較好;無鎂組細(xì)胞結(jié)構(gòu)受損,細(xì)胞... 

【文章來源】：佳木斯大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Ca2+穩(wěn)態(tài)在器官中的調(diào)節(jié)

A B CD E圖1HE 染色結(jié)果（40X10）注：A：對照組；B：無鎂組；C：無鎂+精胺組；D：無鎂+calhex231 組；E：無鎂+精胺+calhex231 組。

無鎂+Chalhex231 組 6 82.80±14.37無鎂+精胺+Chalhex231 組 6 82.04±17.37圖3 細(xì)胞存活率注：A、B、C、D、E 五組分別為對照組、無鎂組、無鎂+精胺組、無鎂+calhex231 組、無鎂+精胺+calhex231 組�！� 表示無鎂組VS 無鎂+精胺組顯著增高(p<0.01)。四、Western blot 測定蛋白量經(jīng) Western blot 蛋白測定結(jié)果顯示 Bcl-2、P-ERK 蛋白表達(dá)量對照組高于無鎂組(p<0.01)，而無鎂組高于無鎂+精胺組、無鎂+精胺+calhex231 組(p<0.05)。CaSR 蛋白量對照組低于無鎂組(p<0.05)，無鎂組低于無鎂+精胺組、無鎂+精胺+calhex231 組(p<0.01)。P-JNK 蛋白量對照組低于無鎂組(p<0.05)，無鎂組明顯低于無鎂+精胺組

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]慢性癲癇大鼠心肌中鈣敏感受體及絲裂原活性蛋白激酶表達(dá)的改變[J]. 郭津,劉陽,王超,白玲玲,韓小唯,張鑫陽,孫艷秋,王魯川,姜志梅.  中國應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2016(05)
[2]正常及無鎂誘導(dǎo)后神經(jīng)元微環(huán)境對少突膠質(zhì)前體細(xì)胞分化的影響[J]. 王玥,蔣莉,劉麗鳴,楊霞,陳恒勝,程莉.  重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2016(08)
[3]鈣敏感受體表達(dá)和Pi3k/Akt通路調(diào)控癲癇大鼠心肌細(xì)胞凋亡的研究[J]. 王麗敏,韓小唯,王超,張鑫陽,王淑靜,白玲玲,孫艷秋,郭津.  中國兒童保健雜志. 2016(05)
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[5]鈣敏感受體通過G蛋白-PLC-IP3信號途徑調(diào)節(jié)肺動脈張力[J]. 李光偉,苗宏志,李波,王國忠,金莉,林巖,鄧志會,肖微.  中國病理生理雜志. 2015(01)
[6]細(xì)胞育齡期對建造發(fā)育期大鼠海馬神經(jīng)元癲癇細(xì)胞模型成功率的影響[J]. 焦聚,馬融.  中醫(yī)兒科雜志. 2014(03)
[7]動脈硬化大鼠心肌鈣敏感受體表達(dá)增加通過激活MAPK通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[J]. 郭津,徐長慶.  中國科技論文在線. 2011(03)
[8]心血管系統(tǒng)鈣敏感受體的研究進(jìn)展[J]. 徐長慶,張偉華.  中國病理生理雜志. 2010(02)
[9]腦心綜合征[J]. 龍潔.  中國實用內(nèi)科雜志. 1997(11)

碩士論文
[1]鈣敏感受體在小鼠缺血性腦卒中的作用及機(jī)制[D]. 甄毅嵐.安徽醫(yī)科大學(xué) 2014



本文編號：3394900