第一部分滑膜成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定目的：應(yīng)用組織塊法分離、培養(yǎng)大鼠顳下頜關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞（SFs）,建立其體外培養(yǎng)體系。方法：無(wú)菌條件下取大鼠顳下頜關(guān)節(jié)滑膜組織,對(duì)滑膜細(xì)胞應(yīng)用組織塊法進(jìn)行原代培養(yǎng),在倒置顯微鏡下觀察其細(xì)胞形態(tài),對(duì)第三代滑膜細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光染色進(jìn)行表面標(biāo)記物的鑒定,以確定該細(xì)胞為滑膜成纖維細(xì)胞（SFs）。結(jié)果：倒置顯微鏡下觀察可見(jiàn)細(xì)胞傳至第3代時(shí),細(xì)胞形態(tài)基本一致,呈梭形,胞漿豐富,核卵圓,位于細(xì)胞中央,核仁清晰。取第三代滑膜細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光染色,可以觀察到所有的滑膜細(xì)胞均對(duì)波形蛋白（vimentin）表達(dá)陽(yáng)性,然而細(xì)胞對(duì)CD68蛋白呈陰性表達(dá),陽(yáng)性染色部位在胞漿內(nèi),CD68染色僅觀察到藍(lán)染的細(xì)胞核,說(shuō)明此細(xì)胞來(lái)源于中胚層,并且具有成纖維細(xì)胞的特征,是滑膜成纖維細(xì)胞。結(jié)論：1.應(yīng)用組織塊法培養(yǎng)出的顳下頜關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞具有純度高及穩(wěn)定的特點(diǎn)；2.傳至第3代時(shí)滑膜細(xì)胞分布均勻、形態(tài)一致,可以用來(lái)進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。第二部分PI3K/Akt信號(hào)通路對(duì)TNF-α誘導(dǎo)滑膜成纖維細(xì)胞分泌IL-1β、COX2影響的實(shí)驗(yàn)研究目的：探討PI3K/Akt信號(hào)傳導(dǎo)通路在TNF-α誘導(dǎo)的顳... 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖６滑膜成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線??３．討論??

圖７各組ＳＦｓ化－１目ｍＲＮＡ相對(duì)表達(dá)量??（＊；與?ＴＮＦ－ａ?組相比，Ｐ＜〇．?０５）??

圖８各組ＳＦｓ?Ｃ說(shuō)２?ｍＲＭ相對(duì)表達(dá)量??（＊：與?ＴＮＦ－ａ?組相比，Ｐ＜〇．〇５）??．??＿２２－?ａｓ山－、２??


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