PI3K/Akt信號通路在TNF-α誘導的大鼠顳下頜關節(jié)滑膜炎模型中的作用研究
發(fā)布時間:2021-09-07 13:23
第一部分滑膜成纖維細胞的分離培養(yǎng)與鑒定目的:應用組織塊法分離、培養(yǎng)大鼠顳下頜關節(jié)滑膜成纖維細胞(SFs),建立其體外培養(yǎng)體系。方法:無菌條件下取大鼠顳下頜關節(jié)滑膜組織,對滑膜細胞應用組織塊法進行原代培養(yǎng),在倒置顯微鏡下觀察其細胞形態(tài),對第三代滑膜細胞進行免疫熒光染色進行表面標記物的鑒定,以確定該細胞為滑膜成纖維細胞(SFs)。結果:倒置顯微鏡下觀察可見細胞傳至第3代時,細胞形態(tài)基本一致,呈梭形,胞漿豐富,核卵圓,位于細胞中央,核仁清晰。取第三代滑膜細胞進行免疫熒光染色,可以觀察到所有的滑膜細胞均對波形蛋白(vimentin)表達陽性,然而細胞對CD68蛋白呈陰性表達,陽性染色部位在胞漿內,CD68染色僅觀察到藍染的細胞核,說明此細胞來源于中胚層,并且具有成纖維細胞的特征,是滑膜成纖維細胞。結論:1.應用組織塊法培養(yǎng)出的顳下頜關節(jié)滑膜成纖維細胞具有純度高及穩(wěn)定的特點;2.傳至第3代時滑膜細胞分布均勻、形態(tài)一致,可以用來進行后續(xù)實驗。第二部分PI3K/Akt信號通路對TNF-α誘導滑膜成纖維細胞分泌IL-1β、COX2影響的實驗研究目的:探討PI3K/Akt信號傳導通路在TNF-α誘導的顳...
【文章來源】:山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖6滑膜成纖維細胞的生長曲線??3.討論??
圖7各組SFs化-1目mRNA相對表達量??(*;與?TNF-a?組相比,P<〇.?05)??
圖8各組SFs?C說2?mRM相對表達量??(*:與?TNF-a?組相比,P<〇.〇5)??.??_22-?as山-、2??
本文編號:3389624
【文章來源】:山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖6滑膜成纖維細胞的生長曲線??3.討論??
圖7各組SFs化-1目mRNA相對表達量??(*;與?TNF-a?組相比,P<〇.?05)??
圖8各組SFs?C說2?mRM相對表達量??(*:與?TNF-a?組相比,P<〇.〇5)??.??_22-?as山-、2??
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