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不同分離方法及培養(yǎng)條件對人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生物活性的影響

發(fā)布時間:2021-09-07 09:01
  目的:觀察不同分離方法及培養(yǎng)條件對人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(Human umbilical cord-mesenchymal stem cells,hUCMSCs)生物活性的影響。方法:分別用組織塊貼壁法、酶消化法獲取hUCMSCs,進行原代培養(yǎng),記錄各組首次傳代時間,相差顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài),流式細(xì)胞儀鑒定其CD29、CD44、HLA-ABC、CD34、CD45、HLA-DR抗原表達(dá)。分別用DMEM-LG、DMEM-HG和DMEM-F12 3種培養(yǎng)基培養(yǎng)第3代、第7代細(xì)胞,MTT法比較不同時間點3種培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞的生長情況。結(jié)果:兩種分離方法均能得到較均一的梭形或者多角形貼壁細(xì)胞,胞核大胞漿豐富,CD29、CD44、HLA-ABC抗原表達(dá)陽性,CD34、CD45、HLA-DR抗原表達(dá)陰性。用DMEM-F12培養(yǎng)的細(xì)胞活力更好,細(xì)胞生長更迅速。結(jié)論:兩種分離方法均能得到hUCMSCs,DMEM-F12培養(yǎng)基更能夠促進細(xì)胞的增殖,較適合于培養(yǎng)hUCMSCs。 

【文章來源】:中國美容醫(yī)學(xué). 2020,29(02)

【文章頁數(shù)】:4 頁

【部分圖文】:

不同分離方法及培養(yǎng)條件對人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生物活性的影響


圖1 兩種分離方法所得原代細(xì)胞貼壁情況(100×)

形態(tài)圖,細(xì)胞,膠原酶,顯微鏡


相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)(膠原酶消化法,100×)

生長曲線,培養(yǎng)基,生長曲線,細(xì)胞


分別以DMEM-LG、DMEM-HG、DMEM-F12 3種培養(yǎng)基培養(yǎng)第3代的hUCMSCs后,MTT法檢測發(fā)現(xiàn)較DMEM-LG和DMEM-HG而言,DMEM-F12組的A492nm明顯較高(見表1)。計數(shù)板法觀察到DMEM-F12組細(xì)胞提前發(fā)生倍增,細(xì)胞總量也最多(見圖3)。3 討論

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞與蠶絲素多孔支架的體外復(fù)合培養(yǎng)[J]. 劉毅,肖宏濤.  中華醫(yī)學(xué)美學(xué)美容雜志. 2010 (01)



本文編號:3389263

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