目的:構(gòu)建裸鼠低氧口腔癌模型,為低氧相關(guān)體內(nèi)研究提供工作基礎(chǔ)。方法:在裸鼠背部皮膚設(shè)計(jì)以單側(cè)旋髂深動(dòng)脈供血的帶蒂皮瓣,切開翻瓣及原位縫合后,通過形態(tài)學(xué)觀察及HIF-1α檢測(cè)確定低氧最佳位點(diǎn);口腔癌細(xì)胞裸鼠接種成瘤后,同法帶瘤切開翻瓣,免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)腫瘤細(xì)胞HIF-1α表達(dá)變化情況。結(jié)果:裸鼠背部帶蒂皮瓣長(zhǎng)寬比在2～3:1時(shí),皮瓣色澤正常,近顱端1/3皮膚細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常,HIF-1α表達(dá)明顯上調(diào),為最佳接種位點(diǎn);帶瘤切開翻瓣48 h后,腫瘤細(xì)胞HIF-1α表達(dá)明顯上調(diào),證實(shí)了腫瘤內(nèi)環(huán)境低氧狀態(tài)的動(dòng)態(tài)變化。結(jié)論:帶蒂皮瓣法構(gòu)建裸鼠低氧口腔癌模型,方法簡(jiǎn)便易行,低氧變量施加確實(shí)可靠,為口腔癌低氧相關(guān)體內(nèi)研究提供了良好的動(dòng)物模型。 

【文章來源】：口腔醫(yī)學(xué)研究. 2019,35(12)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

裸鼠皮膚低氧模型構(gòu)建

所有裸鼠術(shù)后生活狀態(tài)良好,無死亡事件發(fā)生。切開翻瓣后48 h,長(zhǎng)寬比在2～3∶1的皮瓣色澤、質(zhì)地基本正常,瓣下無積血積液(圖1c)。當(dāng)長(zhǎng)寬比大于4∶1時(shí),皮瓣尖端變黑結(jié)痂,有壞死表現(xiàn)(圖1f)。免疫組化染色結(jié)果顯示,本組大小為20 mm×10 mm的皮瓣各段,皮膚組織結(jié)構(gòu)完整,細(xì)胞形態(tài)正常,無液化、空泡化等壞死表現(xiàn)(圖2a,2b);皮膚鱗狀上皮細(xì)胞HIF-1α表達(dá)自遠(yuǎn)顱端向近顱端逐漸升高,近顱端1/3上調(diào)最為顯著(圖2b)。Western blot結(jié)果與免疫組化結(jié)果類似,各段組織均可見HIF-1α表達(dá),皮瓣近顱端1/3皮膚組織HIF-1α顯著上調(diào)(圖2c)。2.2 HIF-1α在口腔癌低氧裸鼠模型中的表達(dá)

口腔癌細(xì)胞接種成瘤后,切開翻瓣可見腫瘤位于皮下,與皮膚有黏連,可隨皮瓣一并翻起,基底部肌膜完整,無侵犯,旋髂深動(dòng)脈及胸外側(cè)動(dòng)脈清晰可見(圖3a)。腫瘤周圍及表面可見大量新生血管,毛細(xì)血管從主干血管發(fā)出支配腫瘤組織,有明顯血管生成表現(xiàn)(圖3a)。皮瓣復(fù)位縫合后48 h,色澤質(zhì)地正常,無壞死表現(xiàn)(圖3b)。免疫組化染色結(jié)果顯示,腫瘤細(xì)胞呈典型鱗狀細(xì)胞癌生長(zhǎng)方式排列,狀態(tài)良好;切開翻瓣后48 h細(xì)胞無空泡化、液化變性等壞死表現(xiàn),而HIF-1α表達(dá)較0h明顯上調(diào),說明腫瘤低氧程度發(fā)生了顯著提高(圖3c,3d)。3 討論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)病及轉(zhuǎn)移機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 王倩,侯大為.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2018(11)



本文編號(hào)：3369581