目的探究長鏈非編碼RNA Gas5通過競爭性結(jié)合miRNAs,調(diào)節(jié)其自噬靶基因的表達(dá),明確lncRNA Gas5調(diào)控RAW264.7細(xì)胞自噬的分子機(jī)制。方法利用3-甲基腺嘌呤（3-MA）和饑餓（Stravation）條件分別處理細(xì)胞建立細(xì)胞自噬抑制和細(xì)胞自噬模型,實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR）檢測各處理組中l(wèi)ncRNA Gas5的表達(dá)量;構(gòu)建lncRNA Gas5過表達(dá)與敲除細(xì)胞模型,通過western blot、激光共聚焦和透射電鏡分別檢測自噬標(biāo)志蛋白LC3和自噬小體的形成與數(shù)量的變化情況,發(fā)現(xiàn)lncRNA Gas5對RAW264.7細(xì)胞自噬的調(diào)控影響;生物信息學(xué)分析預(yù)測lncRNA Gas5靶向的mi RNAs及其自噬相關(guān)靶基因,確定miR-181c-5p及其靶基因Atg5作為研究對象;分別構(gòu)建Gas5-wt/mut和Atg5 3’UTR-wt/mut重組報(bào)告載體,通過檢測熒光素酶活性的變化并結(jié)合qRT-PCR檢測來驗(yàn)證miR-181c-5p對lncRNA Gas5及Atg5的靶向調(diào)控作用;通過qRT-PCR檢測lncRN... 

【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
前言
第一部分 LncRNAGas5對RAW264.7細(xì)胞自噬的影響
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第二部分 LncRNAGas5靶基因的預(yù)測及靶向關(guān)系的驗(yàn)證
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第三部分 LncRNAGas5競爭性結(jié)合miR-181c-5p對細(xì)胞自噬的調(diào)控
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
個(gè)人簡介
開題、中期及學(xué)位論文答辯委員組成


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Non-coding RNAs and Their Roles in Stress Response in Plants[J]. Jingjing Wang,Xianwen Meng,Oxana B.Dobrovolskaya,Yuriy L.Orlov,Ming Chen.  Genomics,Proteomics & Bioinformatics. 2017(05)
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[3]致病微生物長鏈非編碼RNA（lncRNA）研究進(jìn)展[J]. 屈艷琳,袁俐.  中國病原生物學(xué)雜志. 2015(01)



本文編號：3359715