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巨噬細(xì)胞極化中特異性分子表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時間:2021-08-16 16:03
  目的探討不同極化方法誘導(dǎo)下,巨噬細(xì)胞特異性分子標(biāo)記的表達(dá)模式。方法提取小鼠骨髓原代細(xì)胞,利用巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF,10 ng/m L)誘導(dǎo)7 d后,將細(xì)胞分為對照組、脂多糖(LPS,100 ng/m L)+干擾素γ(INF-γ,10 ng/m L)處理組、白細(xì)胞介素4(IL-4,20 ng/m L)和IL-13(10 ng/m L)處理組、LPS(100 ng/m L)和免疫復(fù)合物(IC,50 ng/m L)處理組、IL-10(10 ng/m L)處理組,通過Q-PCR和ELISA檢測相關(guān)分子標(biāo)記的表達(dá)情況,利用Western blot和流式細(xì)胞技術(shù)分別檢測相關(guān)信號通路和細(xì)胞表面特異性分子的表達(dá)改變。結(jié)果 M-CSF誘導(dǎo)后,表達(dá)巨噬細(xì)胞特征性分子F4/80的細(xì)胞占(91.4±5.65)%。和其他組相比,CXC趨化因子9(CXCL9)的mRNA和蛋白水平在LPS聯(lián)合INF-γ誘導(dǎo)的M1巨噬細(xì)胞中顯著增高(均P<0.01),CC趨化因子17(CCL17)的mRNA和蛋白水平在IL-4和IL-13誘導(dǎo)的M2a細(xì)胞中增加最明顯(均P<0.01),CCL1的mRNA和蛋白... 

【文章來源】:廣東藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,36(01)

【文章頁數(shù)】:7 頁

【部分圖文】:

巨噬細(xì)胞極化中特異性分子表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究


流式檢測原代巨噬細(xì)胞的比例

巨噬細(xì)胞,分子,比例,表面


不同處理對巨噬細(xì)胞中相關(guān)分子mRNA水平的變化的影響

蛋白,細(xì)胞培養(yǎng),分子,巨噬細(xì)胞


結(jié)果如圖4所示,LPS能夠顯著誘導(dǎo)CD38蛋白的表達(dá)并定位在細(xì)胞膜上。本課題組也檢測了作為M2巨噬細(xì)胞的常用分子標(biāo)記CD206蛋白[1]。結(jié)果顯示,IL-4+IL-13處理以及IL-10處理能夠增強(qiáng)其表達(dá)。另外,LPS+IC能夠刺激LIGHT蛋白的表達(dá)(圖4)。結(jié)果表明,在流式分析中,CD38蛋白可作為M1巨噬細(xì)胞特異性的分子標(biāo)記;LIGHT蛋白可作為M2b巨噬細(xì)胞特異性的分子標(biāo)記。圖4 流式細(xì)胞儀檢測不同型別巨噬細(xì)胞中表面分子的表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]伊馬替尼抑制脂多糖誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞炎癥表型[J]. 王樂旬,吳惠娟,張盛昔,楊瀟,郭姣.  中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2019(05)
[2]CXCL13與惡性腫瘤的研究進(jìn)展[J]. 朱路得,張國龍,王秀麗.  國際免疫學(xué)雜志. 2017 (05)



本文編號:3345979

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