目的建立惡性瘧原蟲合子/動(dòng)合子表面25蛋白（25 KDa Plasmodium falciparum sexual stage protein,Pfs25）的ELISA定量檢測(cè)方法。方法以雙抗體夾心ELISA法為基礎(chǔ),建立Pfs25蛋白的ELISA定量檢測(cè)方法,并對(duì)該方法進(jìn)行重復(fù)性和準(zhǔn)確性驗(yàn)證。用建立的方法檢測(cè)不同重組菌株、CHO細(xì)胞中,以及經(jīng)10 L發(fā)酵罐培養(yǎng)菌株純化各階段樣品中Pfs25蛋白的表達(dá)量。結(jié)果建立的方法線性范圍為0¹.6μg/ml,R2=0.984,檢測(cè)靈敏度為0.032μg/ml,回收率為81%¹19.0%,CV﹤15%。Pfs25-Pet42a/DE3表達(dá)后的Pfs25蛋白濃度在2.03⁷.26μg/ml;Pfs25-p GAPZαA/GS115、Pfs25-p PICZαA/GS115和（α-Pfs25）8-p AO815/GS115表達(dá)后的Pfs25蛋白濃度分別為113、105和280μg/ml;3株P(guān)fs25/CHO細(xì)胞表達(dá)的Pfs25蛋白濃度分別為106.11、116.89和155.01μg/... 

【文章來源】：中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2016,29(12)CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 參考品及樣品
    1.2 細(xì)胞
    1.3 主要試劑及儀器
    1.4 ELISA定量檢測(cè)方法的建立
    1.5 方法的驗(yàn)證
        1.5.1 重復(fù)性
        1.5.2 準(zhǔn)確性
            1.5.2. 1 加標(biāo)回收試驗(yàn)
            1.5.2. 2 回收試驗(yàn)
    1.6 方法的初步應(yīng)用
        1.6.1 樣品的檢測(cè)
        1.6.2 樣品的SDS-PAGE分析
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 方法的驗(yàn)證
        2.1.1 重復(fù)性
        2.1.2 準(zhǔn)確性
    2.2 方法的初步應(yīng)用
        2.2.1 重組菌株中Pfs25蛋白的表達(dá)
        2.2.2 Pfs25蛋白純化步驟的定量分析
3 討論



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