目的探討miR-208b對小鼠HL-1房顫細胞鈣超載的影響,并分析其作用機制。方法將小鼠HL-1心房肌細胞隨機分為3組:對照組、起搏組和miR-208b組。后兩組建立快速起搏HL-1房顫細胞模型,然后將miR-208b模擬物轉(zhuǎn)染至miR-208b組細胞,將模擬物陰性對照轉(zhuǎn)染至起搏組細胞,對照組不處理。全細胞膜片鉗技術(shù)檢測動作電位時程（APD）及L型鈣電流(I_Ca,L)的電流密度,實時熒光定量PCR及Western Blot檢測鈣通道蛋白mRNA及蛋白的表達。結(jié)果與對照組相比,起搏組和miR-208b組細胞中miR-208b表達顯著增加（P <0. 05）,且miR-208b組高于起搏組（P <0. 05）。與對照組相比,起搏組和miR-208b組APD50、APD90、I_Ca,L的電流密度、CACNA1C mRNA、CACNB2 mRNA、CaV1. 2蛋白、SERCA2 mRNA及SERCA2蛋白的表達均顯著降低（P <0. 05）,且miR-208b組低于起搏組（P <0. 05）。結(jié)論 miR-208b在小鼠HL... 

【文章來源】：臨床和實驗醫(yī)學雜志. 2019,18(20)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細胞培養(yǎng)及分組
    1.2 房顫細胞模型建立[5]
    1.3 細胞轉(zhuǎn)染
    1.4 全細胞膜片鉗技術(shù)
    1.5 實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測
    1.6 Western Blot
    1.7 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
    2.1 各組細胞miR-208b的表達
    2.2 各組細胞動作電位時程的對比
    2.3 各組細胞內(nèi)L型鈣離子電流的變化
    2.4 各組細胞內(nèi)L型鈣離子通道亞基(CACNA1C和CACNB2)的表達
    2.5 各組細胞內(nèi)肌漿網(wǎng)鈣泵(SERCA2)的表達
3 討論
4 結(jié)論



本文編號：3338401