本文關(guān)鍵詞：BCG免疫小鼠血清特異性抗體與脾臟免疫相關(guān)基因表達的相關(guān)性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:接種卡介苗(Bacillus Calmettee-Guerin,BCG)是人類預(yù)防結(jié)核病(tuberculosis,TB)的主要手段之一。BCG是世界上唯一一種得到許可的結(jié)核病疫苗,然而近些年,它的多種弊端正逐漸顯現(xiàn)。因此,人們需要深入了解BCG誘導機體產(chǎn)生免疫效應(yīng)的機制,這樣才能在此基礎(chǔ)上研發(fā)更為有效的新型結(jié)核疫苗。本研究在以BCG免疫小鼠后,觀察不同時間點的血清特異性抗體效價、脾臟免疫相關(guān)細胞因子表達以及脾臟免疫相關(guān)受體分布情況,分析其變化規(guī)律及相關(guān)性,為探究BCG的免疫機制及研發(fā)新型結(jié)核疫苗奠定基礎(chǔ)。方法:利用BCG免疫小鼠,采集不同時間點的外周血和脾臟樣本。應(yīng)用間接ELISA方法檢測血清中特異性抗體效價,實時熒光定量PCR方法檢測脾臟中免疫相關(guān)細胞因子IL-2、IL-10、IL-4、IL-12、IFN-γ的表達水平,直接免疫熒光組化方法檢測脾臟中免疫相關(guān)受體TLR2、TLR9的表達分布情況。結(jié)果:BCG免疫小鼠后,成功檢測到血清中特異性抗體水平隨著時間延續(xù)呈現(xiàn)一種緩慢上升-明顯上升-緩慢上升-明顯上升的趨勢,而總體呈上升趨勢,證實BCG可以誘導機體產(chǎn)生體液免疫。成功檢測到脾臟中IL-2、IL-10、IL-4、IL-12、IFN-γ的表達量發(fā)生不同程度的變化,IL-2,INF-γ兩種Th1型細胞因子的表達水平在接種后期顯著升高,而Th1型細胞因子IL-4的表達水平卻發(fā)生明顯下降。脾臟中的TLR2受體在BCG免疫小鼠的前期階段表達顯著上升,在免疫的后期則下降為普通表達水平。TLR9受體則在BCG免疫小鼠的中期階段表達顯著上升,而在免疫的后期會下降為普通表達水平。結(jié)論:在BCG誘導機體產(chǎn)生免疫效應(yīng)的過程中,機體內(nèi)的血清特異性抗體、免疫相關(guān)細胞因子和免疫相關(guān)受體之間存在著相互聯(lián)系。在免疫的后期,機體中Th1型細胞因子和體液免疫效應(yīng)呈正相關(guān),而一些Th2型細胞因子則與體液免疫效應(yīng)呈負相關(guān)性。
【關(guān)鍵詞】：卡介苗免疫 特異性抗體 免疫相關(guān)細胞因子 免疫相關(guān)受體 相關(guān)性
【學位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R392
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-8
• 前言8-9
• 第一篇 文獻綜述9-22
• 第一章 結(jié)核病及其疫苗研究進展9-16
• 1.1 結(jié)核病9-10
• 1.2 機體抗結(jié)核免疫的分子機制10-13
• 1.2.1 固有免疫10-11
• 1.2.2 適應(yīng)性免疫11-13
• 1.3 結(jié)核病疫苗13-16
• 1.3.1 BCG/卡介苗13-14
• 1.3.2 重組活疫苗14
• 1.3.3 亞單位疫苗14
• 1.3.4 病毒載體疫苗14-15
• 1.3.5 DNA疫苗15-16
• 第二章 系統(tǒng)疫苗學在疫苗效能評價中的應(yīng)用16-22
• 2.1 系統(tǒng)疫苗學概念的由來16-17
• 2.2 系統(tǒng)疫苗學與傳統(tǒng)疫苗學的不同點17-18
• 2.2.1 研究思路不同17
• 2.2.2 研究對象不同17
• 2.2.3 研究重點不同17-18
• 2.2.4 研究的手段不同18
• 2.3 系統(tǒng)疫苗學與疫苗效能評價18-20
• 2.3.1 在黃熱病疫苗效能評價中的應(yīng)用18-19
• 2.3.2 在艾滋病疫苗中的應(yīng)用19
• 2.3.3 在其他疫苗研究中的應(yīng)用19-20
• 2.4 系統(tǒng)疫苗學用于疫苗效能評價存在的問題及其展望20-21
• 2.5 研究的目的和意義21-22
• 第二篇 研究內(nèi)容22-43
• 第一章 BCG免疫小鼠、樣本收集及血清特異性抗體測定22-27
• 1.1 材料和方法22-24
• 1.2 結(jié)果與分析24-25
• 1.3 討論25-27
• 第二章 小鼠脾臟中部分免疫相關(guān)細胞因子表達水平的檢測27-34
• 2.1 材料和方法27-30
• 2.1.1 材料27
• 2.1.2 試驗方法27-30
• 2.2 結(jié)果與分析30-33
• 2.2.1 小鼠脾臟總RNA瓊脂糖凝膠電泳檢測結(jié)果30
• 2.2.2 目的基因的熒光定量結(jié)果30-31
• 2.2.3 數(shù)據(jù)分析結(jié)果31-33
• 2.3 討論33-34
• 第三章 小鼠脾臟中免疫相關(guān)受體表達分布情況的檢測34-43
• 3.1 材料和方法34-36
• 3.1.1 材料34-35
• 3.1.2 實驗方法35-36
• 3.1.3 圖像分析及統(tǒng)計學處理36
• 3.2 結(jié)果與分析36-41
• 3.2.1 小鼠脾臟TLR2受體的免疫熒光染色結(jié)果36-38
• 3.2.2 小鼠脾臟TLR9受體的免疫熒光染色結(jié)果38-40
• 3.2.3 陰性對照組免疫熒光染色結(jié)果40
• 3.2.4 小鼠脾臟的HE染色結(jié)果40-41
• 3.3 討論41-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻44-54
• 作者簡介54-55
• 致謝55

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 湯建中;張愛君;劉宏鵬;丁淑琴;徐廣賢;;結(jié)核分枝桿菌溶血磷脂酶對RAW264.7細胞因子及細胞凋亡的影響[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2014年24期

  本文關(guān)鍵詞：BCG免疫小鼠血清特異性抗體與脾臟免疫相關(guān)基因表達的相關(guān)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：333460