Ⅲ型登革病毒在C6/36及Vero細胞中復制對其毒力的影響
發(fā)布時間:2021-06-07 04:45
目的探討Ⅲ型登革病毒(dengue virus,DENV)在C6/36和Vero細胞中復制對其毒力的影響。方法將DV3-1及DV3-2兩株Ⅲ型DENV在C6/36細胞上接種傳代培養(yǎng),待其毒力穩(wěn)定再接種至Vero細胞連續(xù)傳代培養(yǎng)。用Ⅲ型DENV標準質粒檢測不同代次病毒拷貝數(shù),PCR擴增獲得傳代毒種全長基因序列,并與原代病毒基因序列進行比對。結果 DV3-1在C6/36細胞上傳代至第17代次(P17-C6/36)時毒力保持穩(wěn)定,DV3-2在盲傳過程中均未見明顯的細胞病變;將DV3-1和DV3-2第17代次病毒在Vero細胞上繼續(xù)傳代,DV3-1傳至第10代次(P10-Vero)CPE為40%,DV3-2傳至第4代次CPE達30%。DV3-1在P17-C6/36時具有較高的病毒拷貝數(shù),在P0(原代病毒)及P10-Vero時病毒拷貝數(shù)偏低。與P0比較,P17-C6/36及P10-Vero全長堿基共16處發(fā)生突變,導致12個氨基酸的非同義突變,其中P0和P10-Vero在第5 826、6 251、7 907位點堿基相同,P17-C6/36相應的氨基酸位點(第1 942、2 084、2 636位點...
【文章來源】:中國生物制品學雜志. 2019,32(10)CSCD
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 質粒、細胞及毒種
1.2 主要試劑
1.3 Ⅲ型DENV的培養(yǎng)
1.4 標準曲線的建立
1.5 病毒液拷貝數(shù)的檢測
1.6 傳代毒種的全基因測序鑒定
1.7 Ⅲ型DENV基因全長突變分析
2 結果
2.1 Ⅲ型DENV的接種培養(yǎng)
2.2 標準曲線的繪制
2.3 病毒液的拷貝數(shù)
2.4 Ⅲ型DENV基因全長突變分析
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]中國2013年報告法定傳染病發(fā)病及死亡特征分析[J]. 王麗萍,曾令佳,任翔,耿夢杰,李中杰,余宏杰. 中華流行病學雜志. 2015 (03)
本文編號:3215892
【文章來源】:中國生物制品學雜志. 2019,32(10)CSCD
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 質粒、細胞及毒種
1.2 主要試劑
1.3 Ⅲ型DENV的培養(yǎng)
1.4 標準曲線的建立
1.5 病毒液拷貝數(shù)的檢測
1.6 傳代毒種的全基因測序鑒定
1.7 Ⅲ型DENV基因全長突變分析
2 結果
2.1 Ⅲ型DENV的接種培養(yǎng)
2.2 標準曲線的繪制
2.3 病毒液的拷貝數(shù)
2.4 Ⅲ型DENV基因全長突變分析
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]中國2013年報告法定傳染病發(fā)病及死亡特征分析[J]. 王麗萍,曾令佳,任翔,耿夢杰,李中杰,余宏杰. 中華流行病學雜志. 2015 (03)
本文編號:3215892
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