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酶消化法分離和培養(yǎng)人源原代跟腱干細胞

發(fā)布時間:2021-06-07 06:03
  目的建立人胎兒來源跟腱干細胞的分離方法,并對人源跟腱干細胞的生物學特性進行鑒定。方法采用酶消化法從胎兒跟腱組織中分離培養(yǎng)跟腱干細胞;通過光學顯微鏡觀察細胞形態(tài);CCK-8法測定細胞增殖能力;流式細胞術檢測表面抗原的表達情況;分別用成骨、成脂和成軟骨誘導培養(yǎng)液誘導其分化,RT-qPCR鑒定分化標記基因表達;同時對跟腱干細胞蛋白表達進行檢測,探究其生物學特性。結(jié)果從胎兒來源的跟腱組織中提取的跟腱干細胞具有特征性的細胞形態(tài);在P3代以內(nèi),細胞增殖差異無統(tǒng)計學意義;細胞高表達CD44、CD90,不表達CD34、CD45;細胞通過誘導分化后成功向骨、脂肪及軟骨細胞分化,相關性基因表達升高;人源跟腱干細胞表達CollagenⅠ、CollagenⅢ、Tenascin-C、Scleraxis。結(jié)論酶消化法是分離、培養(yǎng)跟腱干細胞的有效辦法,跟腱干細胞表達與跟腱損傷修復有關的蛋白,為跟腱干細胞的鑒定及臨床應用提供理論依據(jù)。 

【文章來源】:生物骨科材料與臨床研究. 2020,17(01)

【文章頁數(shù)】:6 頁

【部分圖文】:

酶消化法分離和培養(yǎng)人源原代跟腱干細胞


P0代hTDSCs細胞融合約70%時光鏡下照片(×100);B.P0代TDSC細胞融合約90%時光鏡下照片(×100);C.P3代hTDSCs細胞融合約70%時光鏡下照片(×100)CCK-8法測定細胞增殖實驗證實:同一代的hTDSCs的2.3細胞多向分化潛能的鑒定

【參考文獻】:
期刊論文
[1]Scleraxis慢病毒基因感染人羊膜間充質(zhì)干細胞向肌腱細胞的定向分化[J]. 朱喜忠,劉子銘,吳術紅,熊華章,楊繼濱,李豫皖,尤奇,金瑛,左晨,劉毅.  中國組織工程研究. 2017(33)
[2]肌腱組織工程材料在肌腱損傷的應用特點及前景[J]. 馮鵬飛,王繼宏,冀云濤,趙佳莉.  中國組織工程研究. 2017(18)
[3]BMP-14誘導骨髓間充質(zhì)干細胞向肌腱細胞分化的實驗研究[J]. 黃曉楠.  生物骨科材料與臨床研究. 2017(02)



本文編號:3216022

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