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長鏈非編碼RNA-ZFAS1通過誘發(fā)心臟鈣超載誘導(dǎo)心肌梗死模型小鼠心肌細(xì)胞凋亡

發(fā)布時間:2021-05-25 14:11
  目的研究長鏈非編碼RNA-ZFAS1(lncRNAZFAS1)對心肌梗死后心肌細(xì)胞凋亡的影響。方法在體水平,尾靜脈注射敲減lncRNA-ZFAS1的腺相關(guān)病毒(AAV9-shZFAS1)后建立敲減lncRNA-ZFAS1的心肌梗死模型小鼠。尾靜脈注射過表達lncRNA-ZFAS1的腺相關(guān)病毒(AAV9-ZFAS1),構(gòu)建過表達ZFAS1的小鼠模型。利用Western印跡法檢測SERCA2a的表達以及凋亡相關(guān)蛋白的表達。細(xì)胞水平,通過轉(zhuǎn)染ZFAS1的過表達質(zhì)粒(pCDNA-ZFAS1)和敲減ZFAS1的siRNA(siZFAS1),構(gòu)建過表達和敲減ZFAS1的細(xì)胞模型。亞細(xì)胞水平利用電鏡測定心臟組織和心肌細(xì)胞的線粒體腫脹情況;利用LIVE/DEAD試劑盒檢測心肌細(xì)胞的活力;利用JC-1染色測定心肌細(xì)胞的線粒體膜電位;利用流式細(xì)胞術(shù)和TUNEL染色檢測ZFAS1對心肌細(xì)胞凋亡的影響。此外,構(gòu)建心臟組織特異性過表達ZFAS1的轉(zhuǎn)基因小鼠,利用optical mapping技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因小鼠心臟鈣穩(wěn)態(tài)情況,利用小動物心動超聲檢測轉(zhuǎn)基因小鼠的心臟功能。利用Western印跡法檢測SERCA2a的... 

【文章來源】:中國藥理學(xué)會第十五次全國學(xué)術(shù)大會論文摘要中國藥理學(xué)會會議論文集

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