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長(zhǎng)鏈非編碼RNA-ZFAS1通過誘發(fā)心臟鈣超載誘導(dǎo)心肌梗死模型小鼠心肌細(xì)胞凋亡

發(fā)布時(shí)間:2021-05-25 14:11
  目的研究長(zhǎng)鏈非編碼RNA-ZFAS1(lncRNAZFAS1)對(duì)心肌梗死后心肌細(xì)胞凋亡的影響。方法在體水平,尾靜脈注射敲減lncRNA-ZFAS1的腺相關(guān)病毒(AAV9-shZFAS1)后建立敲減lncRNA-ZFAS1的心肌梗死模型小鼠。尾靜脈注射過表達(dá)lncRNA-ZFAS1的腺相關(guān)病毒(AAV9-ZFAS1),構(gòu)建過表達(dá)ZFAS1的小鼠模型。利用Western印跡法檢測(cè)SERCA2a的表達(dá)以及凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)。細(xì)胞水平,通過轉(zhuǎn)染ZFAS1的過表達(dá)質(zhì)粒(pCDNA-ZFAS1)和敲減ZFAS1的siRNA(siZFAS1),構(gòu)建過表達(dá)和敲減ZFAS1的細(xì)胞模型。亞細(xì)胞水平利用電鏡測(cè)定心臟組織和心肌細(xì)胞的線粒體腫脹情況;利用LIVE/DEAD試劑盒檢測(cè)心肌細(xì)胞的活力;利用JC-1染色測(cè)定心肌細(xì)胞的線粒體膜電位;利用流式細(xì)胞術(shù)和TUNEL染色檢測(cè)ZFAS1對(duì)心肌細(xì)胞凋亡的影響。此外,構(gòu)建心臟組織特異性過表達(dá)ZFAS1的轉(zhuǎn)基因小鼠,利用optical mapping技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因小鼠心臟鈣穩(wěn)態(tài)情況,利用小動(dòng)物心動(dòng)超聲檢測(cè)轉(zhuǎn)基因小鼠的心臟功能。利用Western印跡法檢測(cè)SERCA2a的... 

【文章來源】:中國(guó)藥理學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要中國(guó)藥理學(xué)會(huì)會(huì)議論文集

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