體外擴(kuò)增是解決臍血造血干細(xì)胞（hematopoietic stem cells,HSCs）移植過程中數(shù)量不足的有效方法。在HSCs的體外擴(kuò)增過程中添加糖類、細(xì)胞因子等外源性物質(zhì),導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)活性氧（Reactive oxygen species,ROS）水平急劇增加,破壞細(xì)胞內(nèi)的氧化還原動(dòng)態(tài)平衡,造成細(xì)胞功能損傷,影響HSCs的體外增殖。因此,有必要對HSCs體外培養(yǎng)過程中細(xì)胞內(nèi)ROS水平進(jìn)行調(diào)控。黃酮類、多酚類和蒽醌類化合物廣泛存在于各種植物中,具有抗氧化活性,在一定的濃度范圍內(nèi)能夠有效的清除自由基,有利于細(xì)胞的體外增殖。為此,本文以新鮮分離的臍血CD34+細(xì)胞為起始細(xì)胞,在無血清培養(yǎng)體系中考察了黃酮類抗氧化物（葛根素和金絲桃苷）濃度對CD34+細(xì)胞體外擴(kuò)增的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):0.1μM葛根素能夠有效地提高總細(xì)胞和CD34+細(xì)胞的擴(kuò)增;與對照組相比,1μM金絲桃苷能夠促進(jìn)總細(xì)胞、CD34+細(xì)胞和CD34+CD38-細(xì)胞的擴(kuò)增,并且兩組之間CD34+細(xì)胞的再擴(kuò)增能力無顯著性差異。培養(yǎng)體系中添加1μM金絲桃苷培養(yǎng)14d后,總細(xì)胞、CD34+細(xì)胞和CD34+CD38-細(xì)胞的擴(kuò)增倍數(shù)分別為54.... 

【文章來源】：華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 前言
    1.1 造血干細(xì)胞特性及其臨床應(yīng)用
        1.1.1 造血干細(xì)胞的生物學(xué)特性
        1.1.2 臍血造血干細(xì)胞臨床應(yīng)用的現(xiàn)狀
    1.2 造血干細(xì)胞體外擴(kuò)增的影響因素
        1.2.1 培養(yǎng)基
        1.2.2 細(xì)胞因子組合
        1.2.3 基質(zhì)細(xì)胞與HSCs共培養(yǎng)體系
        1.2.4 氧分壓
    1.3 造血干細(xì)胞與骨髓微環(huán)境
        1.3.1 骨髓微環(huán)境的組成及其作用
        1.3.2 低氧微環(huán)境對HSCs的影響
    1.4 活性氧對造血干細(xì)胞功能的調(diào)控
        1.4.1 活性氧的產(chǎn)生
        1.4.2 細(xì)胞內(nèi)活性氧的清除機(jī)制
        1.4.3 活性氧對造血干細(xì)胞生理功能的影響
    1.5 抗氧化物對細(xì)胞生理功能的影響
        1.5.1 抗氧化物及其作用機(jī)制
        1.5.2 黃酮類抗氧化物對細(xì)胞功能的影響
        1.5.3 多酚類抗氧化物對細(xì)胞功能的影響
        1.5.4 蔥醌類抗氧化物對細(xì)胞生理狀態(tài)的影響
    1.6 課題研究內(nèi)容及意義
第2章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.1 細(xì)胞分離試劑
        2.2.2 培養(yǎng)基
        2.2.3 細(xì)胞因子
        2.2.4 抗氧化劑
        2.2.5 免疫熒光抗體
        2.2.6 其他試劑
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 CD34~+細(xì)胞的分離
        2.3.2 CD34~+細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.3.3 CD34~+細(xì)胞的再擴(kuò)增培養(yǎng)
        2.3.4 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        2.3.5 細(xì)胞表型分析
        2.3.6 細(xì)胞中活性氧(ROS)水平的檢測
        2.3.7 細(xì)胞凋亡測定
        2.3.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第3章 黃酮類抗氧化物對CD34~+細(xì)胞體外擴(kuò)增的影響
    3.1 葛根素的濃度對CD34~+細(xì)胞體外擴(kuò)增特性的影響
    3.2 金絲桃苷濃度對CD34~+細(xì)胞體外擴(kuò)增特性的影響
    3.3 金絲桃苷對CD34~+細(xì)胞再擴(kuò)增的影響
    3.4 金絲桃苷對CD34~+細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響
    3.5 金絲桃苷對細(xì)胞凋亡的影響
    3.6 討論
    3.7 本章小結(jié)
第4章 多酚類、蔥醌類抗氧化物對CD34~+細(xì)胞體外擴(kuò)增的影響
    4.1 兒茶素對CD34~+細(xì)胞體外擴(kuò)增特性的影響
        4.1.1 兒茶素濃度對CD34~+細(xì)胞體外擴(kuò)增的影響
        4.1.2 兒茶素對CD34~+細(xì)胞再擴(kuò)增的影響
        4.1.3 兒茶素對CD34~+細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響
        4.1.4 兒茶素對細(xì)胞凋亡的影響
    4.2 蘆薈大黃素對CD34~+細(xì)胞體外擴(kuò)增特性的影響
        4.2.1 蘆薈大黃素濃度對CD34~+細(xì)胞體外擴(kuò)增的影響
        4.2.2 蘆薈大黃素對CD34~+細(xì)胞再擴(kuò)增的影響
        4.2.3 蘆薈大黃素對CD34~+細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響
        4.2.4 蘆薈大黃素對細(xì)胞凋亡的影響
    4.3 討論
    4.4 本章小結(jié)
第5章 全文總結(jié)與展望
    5.1 全文總結(jié)
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3204307