目的構(gòu)建小鼠精原干細胞（SSCs）體外培養(yǎng)體系,并對培養(yǎng)的SSCs進行功能鑒定。方法采用兩步酶法消化小鼠睪丸組織制備單細胞懸液,CD90、CD49f免疫磁珠分選SSCs,采用Sertoli細胞共培養(yǎng)方法體外培養(yǎng)SSCs,并將培養(yǎng)的SSCs移植到受體小鼠曲細精管,定期觀察移植后SSCs在受體小鼠曲細精管增殖分化情況。結(jié)果本次研究培養(yǎng)的SSCs在體外大量增殖,SSCs標記物檢測顯示,CD90、CD49f未分化SSCs標記物表達陽性率均>99%,而CD117分化SSCs標記物表達陽性率<1%,SSCs轉(zhuǎn)染GFP慢病毒后移植到受體小鼠曲細精管內(nèi)可以廣泛定植并增殖分化,移植后12w在受體小鼠曲細精管內(nèi)可見GFP⁺精子細胞。結(jié)論本研究中建立的小鼠SSCs體外培養(yǎng)體系,不僅能夠促進SSCs大量增殖,同時保持了其未分化SSCs干細胞特性。 

【文章來源】：中國性科學(xué). 2019,28(11)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗動物
    1.2 培養(yǎng)方法
        1.2.1 Sertoli細胞培養(yǎng)液
        1.2.2 SSCs培養(yǎng)液
        1.2.3 睪丸細胞分離
        1.2.4 睪丸Sertoli細胞分離純化
        1.2.5 免疫磁珠SSCs分離純化
        1.2.6 SSCs/Sertoli細胞共培養(yǎng)
        1.2.7 SSCs細胞體外培養(yǎng)
        1.2.8 SSCs移植受體建立和SSCs移植
2 結(jié)果
    2.1 Sertoli細胞培養(yǎng)
    2.2 SSCs/ Sertoli細胞共培養(yǎng)
    2.3 SSCs細胞體外培養(yǎng)
    2.4 SSCs標記物檢測
    2.5 流式細胞儀SSCs標記物檢測
    2.6 SSCs異體移植
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]山羊精原干細胞的鑒定及培養(yǎng)體系優(yōu)化的研究[J]. 張欽愷,姜穎,王明明,董煥聲,尉玉杰,潘慶杰.  中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2016(07)
[2]BALB/c小鼠精原干細胞體外長期培養(yǎng)和鑒定[J]. 申復(fù)進,張茨,楊嗣星,熊云鶴,廖文彪,杜賢進,王玲瓏.  中華男科學(xué)雜志. 2008(11)
[3]精原細胞異基因移植研究進展及其面臨的困惑[J]. 馬良宏,丁強,王翔.  中華男科學(xué)雜志. 2006(03)



本文編號：3181779