發(fā)布時(shí)間：2017-04-20 05:04

  本文關(guān)鍵詞：人參皂苷Rb1、Rb2及Rg3在核酸疫苗中的免疫佐劑活性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：人參是一種多年生五加科草本植物,其主要活性成分為人參皂苷與人參多糖。自古以來人參就是一味神奇的中藥,具有安神、調(diào)整血壓、提高身體免疫力的功效。近年來,許多研究發(fā)現(xiàn)人參皂苷可以調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答反應(yīng),而核酸疫苗的免疫原性又相對不足,因此,本論文研究了人參皂苷Rb1、Rb2及Rg3作為核酸疫苗免疫佐劑的活性。本實(shí)驗(yàn)分別以人參皂苷Rb1、Rb2及Rg3作為免疫佐劑與核酸疫苗共同免疫C57BL/6J小鼠,同時(shí)以pc DNA3.1及PBS免疫小鼠作為對照組。接種方式為肌肉注射后電穿孔,兩次免疫間隔兩周,第二次免疫兩周后,對小鼠進(jìn)行眼球取血收集血清,以Western Blot定性地檢測PBS、pc DNA3.1、p D-HSP90C、p D-HSP90C/Rb1、p D-HSP90C/Rb2、p D-HSP90C/Rg3各組血清中抗體的特異性;用ELISA方法及與ELISA試劑盒定量地分別檢測各組血清的抗體滴度及細(xì)胞因子濃度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與p D-HSP90C組相比,p D-HSP90C/Rb1與p D-HSP90C/Rg3兩組均產(chǎn)生了較高的Ig G、Ig G1、Ig G2b抗體滴度及細(xì)胞因子IL-2、4,而Rb2在核酸疫苗p D-HSP90C中沒有明顯的佐劑效應(yīng)。本論文實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明人參皂苷Rb1、Rg3有效地促進(jìn)了Th1與Th2型免疫應(yīng)答,而Rb2無明顯作用,為人參皂苷在疫苗佐劑領(lǐng)域的研發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：人參皂苷Rb1、Rb2、Rg3 核酸疫苗 免疫佐劑
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R392
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-8
• 中英文縮寫8-9
• 第一章 引言9-20
• 1.1 核酸疫苗9-11
• 1.1.1 核酸疫苗的作用機(jī)理及免疫方法9-10
• 1.1.2 核酸疫苗與傳統(tǒng)疫苗相比的優(yōu)勢10
• 1.1.3 核酸疫苗自身的局限性10-11
• 1.2 疫苗佐劑及其分類11-13
• 1.2.1 佐劑概述11
• 1.2.2 鋁鹽佐劑11-12
• 1.2.3 脂質(zhì)體12
• 1.2.4 細(xì)胞因子12
• 1.2.5 乳化油12-13
• 1.2.6 細(xì)菌的CpGDNA13
• 1.3 新一代的免疫佐劑—人參皂苷13-18
• 1.3.1 人參皂苷的分類13-15
• 1.3.2 人參皂苷對免疫系統(tǒng)的影響15-17
• 1.3.3 人參皂苷的免疫佐劑活性與其結(jié)構(gòu)的關(guān)系17-18
• 1.4 白色念珠菌簡述18-19
• 1.5 本研究的目的、內(nèi)容及意義19-20
• 第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法20-36
• 2.1 材料20-22
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動物20
• 2.1.2 核酸疫苗20
• 2.1.3 免疫佐劑20
• 2.1.4 試劑和儀器20-22
• 2.2 方法22-36
• 2.2.1 分組和免疫22
• 2.2.2 核酸疫苗pD-HSP90C的制備22-27
• 2.2.3 重組蛋白rP-HSP90C的制備27-30
• 2.2.4 Western Blot檢測抗體特異性30-33
• 2.2.5 間接ELISA法檢測抗體滴度33-35
• 2.2.6 ELISA試劑盒檢測小鼠血清中IL-2 與IL-4 的含量35
• 2.2.7 數(shù)據(jù)分析35-36
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析36-46
• 3.1 核酸疫苗pD-HSP90C的酶切驗(yàn)證36-37
• 3.2 重組蛋白rP-HSP90C的分離純化結(jié)果37
• 3.3 人參皂苷Rb1、Rb2 及Rg3 作為免疫佐劑時(shí)對核酸疫苗pD-HSP90C活性的影響37-46
• 3.3.1 Western Blot分析小鼠抗血清中抗體的特異性38-40
• 3.3.2 人參皂苷Rb1、Rb2 及Rg3 對免疫小鼠抗血清中特異性抗體IgG與IgG1、IgG2b抗體滴度的影響40-44
• 3.3.3 人參皂苷Rb1、Rb2 及Rg3 對免疫小鼠抗血清中細(xì)胞因子IL-2、IL-4 含量的影響44-46
• 第四章 討論46-48
• 4.1 人參皂苷Rb1、Rb2 及Rg3 對Th細(xì)胞免疫應(yīng)答的影響46-47
• 4.1.1 人參皂苷Rb1、Rg3 促進(jìn)了Th1 型免疫應(yīng)答46-47
• 4.1.2 人參皂苷Rb1、Rg3 促進(jìn)了Th2 型免疫應(yīng)答47
• 4.1.3 人參皂苷Rb2 未見明顯的免疫增強(qiáng)作用47
• 4.2 人參皂苷Rb1、Rb2 及Rg3 佐劑活性與其結(jié)構(gòu)的關(guān)系47-48
• 結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 致謝53

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：317926