發(fā)布時(shí)間：2017-04-19 17:09

  本文關(guān)鍵詞：BDSF增強(qiáng)RAW264.7巨噬細(xì)胞的吞噬作用以及殺傷癌細(xì)胞的能力，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：巨噬細(xì)胞來(lái)源于生物體中的單核細(xì)胞,是一種位于組織內(nèi)的白細(xì)胞,具有吞噬病原體等保護(hù)機(jī)體的作用,十二烷基癸烯酸BDSF是一種來(lái)源于細(xì)菌的小分子短鏈脂肪酸,可以抑制白念珠菌的生長(zhǎng)。本課題研究BDSF在體外對(duì)小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞吞噬白念珠菌的作用,及對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞的抗癌活性和蛋白組學(xué)的影響。通過(guò)瑞氏吉姆薩染色法檢測(cè)BDSF對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬酵母態(tài)白念珠菌的吞噬能力的變化,并利用共聚焦顯微鏡觀察巨噬細(xì)胞形態(tài)變化及吞噬白念珠菌的過(guò)程;采用iTRAQ蛋白組學(xué)定量檢定技術(shù)和ELISA試劑盒檢測(cè)BDSF對(duì)巨噬細(xì)胞抗癌活性及蛋白組的變化；結(jié)果顯示,BDSF可顯著增強(qiáng)RAW264.7巨噬細(xì)胞吞噬白念珠菌的吞噬能力,100μM BDSF提升其吞噬率和吞噬指數(shù)近5倍;并且BDSF可以增強(qiáng)巨噬細(xì)胞殺傷癌細(xì)胞的能力,促進(jìn)細(xì)胞分泌更多的TNF-α,100 μM BDSF作用下對(duì)癌細(xì)胞的殺傷活性和’TNF-α表達(dá)量可增加4倍。iTRAQ檢測(cè)結(jié)果顯示BDSF能夠促進(jìn)RAW264.7巨噬細(xì)胞的多種蛋白表達(dá)如Siae唾液酸乙酰酯酶和Mgp基質(zhì)Gla蛋白。本課題中BDSF在細(xì)胞免疫學(xué)中增強(qiáng)作用顯著,對(duì)細(xì)胞吞噬及癌癥治療等研究具有潛在的意義值得深入研究。本課題同時(shí)檢測(cè)BDSF的類似物ATCs對(duì)白念珠菌的體外作用,并通過(guò)顯微鏡觀察ATCs對(duì)白念珠菌生長(zhǎng)的影響。BDSF類似物ATCs中的ATC-C8和ATC-C10在濃度為200μM時(shí)可有效抑制白念珠菌出芽生殖與生長(zhǎng),并抑制白念珠菌由酵母相向菌絲相的形態(tài)轉(zhuǎn)變,同時(shí)還能促進(jìn)白念珠菌的菌絲縮短。
【關(guān)鍵詞】：巨噬細(xì)胞 BDSF 白念珠菌 吞噬率 iTRAQ ATCs 形態(tài)轉(zhuǎn)變
【學(xué)位授予單位】：南京郵電大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R392
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 第一章 緒論8-15
• 1.1 巨噬細(xì)胞免疫功能研究進(jìn)展8-12
• 1.1.1 巨噬細(xì)胞8-9
• 1.1.2 巨噬細(xì)胞在免疫功能中的作用9-11
• 1.1.3 巨噬細(xì)胞與癌細(xì)胞作用相關(guān)研究11-12
• 1.2 白念珠菌及相關(guān)疾病研究進(jìn)展12-13
• 1.2.1 白念珠菌12-13
• 1.2.2 BDSF對(duì)白念珠菌體外作用的研究13
• 1.3 免疫系統(tǒng)對(duì)白念珠菌作用的研究進(jìn)展13-15
• 第二章 BDSF對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬酵母態(tài)白念珠菌能力的影響15-25
• 2.1 前言15-16
• 2.1.1 細(xì)胞15
• 2.1.2 菌種15
• 2.1.3 培養(yǎng)基及化學(xué)試劑15-16
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法16-18
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)16-17
• 2.2.2 菌種培養(yǎng)17
• 2.2.3 BDSF對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬酵母態(tài)白念珠菌能力的作用17-18
• 2.2.4 共聚焦顯微鏡拍攝吞噬過(guò)程18
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析18-23
• 2.3.1 BDSF可顯著增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬能力18-23
• 2.4 本章小結(jié)23-25
• 第三章 BDSF對(duì)小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞抗癌能力及蛋白組學(xué)影響的研究25-34
• 3.1 前言25
• 3.2 實(shí)驗(yàn)材料25-26
• 3.2.1 細(xì)胞25
• 3.2.2 培養(yǎng)基及化學(xué)試劑25-26
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法26-28
• 3.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)26-27
• 3.3.2 BDSF對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞抑制癌細(xì)胞能力的影響27
• 3.3.3 ELISA定量檢測(cè)腫瘤壞死因子TNF-α27-28
• 3.3.4 iTRAQ蛋白組學(xué)技術(shù)檢測(cè)BDSF對(duì)巨噬細(xì)胞蛋白組的影響28
• 3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析28-33
• 3.4.1 BDSF增強(qiáng)巨噬細(xì)胞殺傷能力28-30
• 3.4.2 BDSF促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌腫瘤壞死因子TNF-α30-31
• 3.4.3 BDSF提高巨噬細(xì)胞內(nèi)多種蛋白質(zhì)的表達(dá)量31-33
• 3.5 本章小結(jié)33-34
• 第四章 BDSF類似物ATCs對(duì)白念珠菌體外作用的研究34-44
• 4.1 前言34-35
• 4.2 實(shí)驗(yàn)材料35
• 4.2.1 菌種35
• 4.2.2 培養(yǎng)基及化合物35
• 4.3 實(shí)驗(yàn)方法35-37
• 4.3.1 菌株培養(yǎng)35-36
• 4.3.2 ATCs對(duì)酵母相白念珠菌生長(zhǎng)的影響36
• 4.3.3 ATCs對(duì)白念珠菌兩相轉(zhuǎn)化的影響36-37
• 4.3.4 ATCs白念珠菌菌絲生長(zhǎng)長(zhǎng)度的影響37
• 4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析37-43
• 4.4.1 ATCs可抑制酵母相白念珠菌出芽生殖與生長(zhǎng)37-41
• 4.4.2 ATCs可抑制白念珠菌由酵母相轉(zhuǎn)化為菌絲相41-42
• 4.4.3 ATCs可促進(jìn)菌絲白念珠菌的菌絲縮短42-43
• 4.5 本章小結(jié)43-44
• 第五章 總結(jié)與展望44-46
• 5.1 總結(jié)44
• 5.2 展望44-46
• 參考文獻(xiàn)46-50
• 附錄1 攻讀碩士學(xué)位期間申請(qǐng)的專利50-51
• 附錄2 攻讀碩士學(xué)位期間參加的科研項(xiàng)目51-52
• 致謝52

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