本文關(guān)鍵詞：生理層流剪切力對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞免疫功能的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)被認(rèn)為是目前功能最為強(qiáng)大的抗原遞呈細(xì)胞,在啟動(dòng)和放大固有免疫和適應(yīng)性免疫應(yīng)答方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在發(fā)揮免疫學(xué)調(diào)節(jié)功能的整個(gè)過(guò)程中,DCs都始終遭受來(lái)自血流、組織間液和淋巴流等的剪切力(shear stress,SS)作用,而DCs對(duì)生理液流SS的應(yīng)答還不得而知。因此,本研究的目的是探討生理層流SS對(duì)DCs免疫學(xué)功能的影響,以期進(jìn)一步深入理解DCs的生物學(xué)功能。方法:外周血單個(gè)核細(xì)胞來(lái)源的單核細(xì)胞,經(jīng)重組人白介素-4(recombinant human interleukin-4,rh IL-4)和重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,rh GM-CSF)誘導(dǎo)獲得未成熟DCs(immature dendritic cells,im DCs),再經(jīng)重組人干擾素-γ(recombinant human interferon,rh IFN-γ)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導(dǎo)獲得成熟DCs(mature dendritic cells,m DCs)。用椎板剪切儀給DCs加載1、5、10、15 dyn/cm2的SS,作用1、3、6、12小時(shí)后在光學(xué)顯微鏡下觀察DCs形態(tài)和檢測(cè)DCs的細(xì)胞骨架F-actin的分布。用FITC標(biāo)記的右旋糖苷與DCs共孵育,以檢測(cè)DCs抗原吞噬能力。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DCs的表型CD11c,CD40,CD80,CD83,CD86,CCR7,CD1a,CD205和HLA-DR的表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DCs表面粘附分子CD18,CD11a,CD54,CD62P和CD106表達(dá)。用芯片技術(shù)檢測(cè)DCs的micro RNA、m RNA和lnc RNA表達(dá)譜,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time q PCR)驗(yàn)證芯片的結(jié)果。結(jié)果:加載SS后,DCs的形態(tài)發(fā)生明顯變化,與對(duì)照組相比較,剪切力使細(xì)胞明顯變小、突起減少,細(xì)胞直徑明顯變小(P0.05),DCs的細(xì)胞骨架(F-actin)發(fā)生了重組;細(xì)胞的抗原吞噬能力下降(P0.05);DCs的表面分子CD1a,CD11c,CD40,CD80,CD83,CD86,CCR7,CD205和HLA-DR的表達(dá)顯著下調(diào)(P0.05);DCs的粘附分子CD18,CD11a,CD54,CD62P和CD106表達(dá)下調(diào)(P0.05)。而且,加載SS后,im DCs有884 m RNAs表達(dá)發(fā)生變化(變化倍數(shù)1.5,p0.05),其中304個(gè)上調(diào),580下調(diào);25個(gè)micro RNAs表達(dá)變化(變化倍數(shù)2,p0.05),21個(gè)上調(diào),4個(gè)下調(diào);811個(gè)lnc RNAs表達(dá)變化(變化倍數(shù)1.5,p0.05),413個(gè)上調(diào),398個(gè)下調(diào)。m DCs有848個(gè)m RNAs表達(dá)發(fā)生變化(變化倍數(shù)1.5,),其中396個(gè)上調(diào),453下調(diào);69個(gè)micro RNAs表達(dá)變化(變化倍數(shù)2,),32個(gè)上調(diào),37個(gè)下調(diào);1056lnc RNAs表達(dá)變化(變化倍數(shù)1.5),658個(gè)上調(diào),398個(gè)下調(diào);部分感興趣的基因被選出做PCR驗(yàn)證,IL-10、FOS、CCR2和TLR2的變化趨勢(shì)與基因芯片的結(jié)果一致,has-mi R-532-3p和has-mi R-665的結(jié)果與芯片的變化趨勢(shì)一致。結(jié)論:總之,SS能夠調(diào)控DCs的形態(tài)、改變細(xì)胞骨架(F-actin)的結(jié)構(gòu)并抑制DCs的免疫免疫表型,基因表達(dá)譜也發(fā)生了顯著地變化,可以推測(cè)SS可能是DCs免疫功能的負(fù)調(diào)控因子,這些結(jié)果支持力學(xué)免疫學(xué)(mechanoimmunology)或者免疫力學(xué)生物學(xué)(immuno-mechanobiology)的學(xué)術(shù)觀點(diǎn),對(duì)深入理解DCs的免疫調(diào)節(jié)功能和提高基于DCs的抗腫瘤疫苗的臨床治療效率來(lái)說(shuō)具有重要意義。?
【關(guān)鍵詞】：樹(shù)突狀細(xì)胞 流體剪切力 免疫功能 細(xì)胞骨架 microRNA mRNA
【學(xué)位授予單位】：貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R392.12
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 略縮詞表9-10
• 0 引言10-15
• 1 材料與方法15-26
• 2 結(jié)果26-54
• 3 討論54-63
• 4 結(jié)論63-65
• 參考文獻(xiàn)65-71
• 綜述71-87
• 參考文獻(xiàn)79-87
• 作者簡(jiǎn)歷87-89
• 致謝89-90
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集90

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 Lars A Ormandy;Anatol F釨rber;Tobias Cantz;Susanne Petrykowska;Heiner Wedemeyer;Monique H銉r(jià)ning;Frank Lehner;Michael P Manns;Firouzeh Korangy;Tim F Greten;;Direct ex vivo analysis of dendritic cells in patients with hepatocellular carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2006年20期

  本文關(guān)鍵詞：生理層流剪切力對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞免疫功能的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：316060