本文關鍵詞：miR-9與MCPIP1互作對流感病毒復制的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)主要侵襲呼吸道上皮細胞,引起從輕微的上呼吸道感染到嚴重肺炎等不同程度的臨床癥狀。mi RNA(micro RNA)家族是一類小的非編碼RNA,可調控其下游靶基因的轉錄和翻譯,且在多種生理和病理進程中都扮演著重要的角色,其中包括病毒與宿主的相互作用。既往的研究表明病毒可以通過改變宿主細胞mi RNA的表達模式,進而重塑宿主細胞內的微環(huán)境以利于病毒的感染、復制和增殖。我們前期基于組學的研究結果表明,IAV感染可以誘導宿主mi R-9的表達。為了探究mi R-9在IAV感染中的作用及其機制,我們進行了以下研究工作。首先,我們充分驗證了不同IAV亞型感染A549細胞后不同時間點mi R-9的表達,結果確證IAV感染可以顯著誘導mi R-9的表達,且其表達峰值的出現(xiàn)早于IAV基質蛋白基因(M)和核蛋白基因(NP)的表達。mi R-9與IAV感染表型關聯(lián)的研究表明,過表達mi R-9后顯著促進了病毒結構蛋白基因在RNA和蛋白水平的表達以及感染性子代病毒的產生,而抑制mi R-9表達時則顯著抑制IAV的增殖。為了解析mi R-9的作用機制,我們預測得到了4452個mi R-9潛在作用的靶基因,通過GO注釋分析等系列生物信息學分析確定了一個待驗證的靶基因——單核細胞誘導蛋白1(monocyte chemoattractant protein 1-induced protein 1,MCPIP1)。其次,有關MCPIP1既往研究的回溯提示我們其既可通過其泛素化酶活性和RNA酶活性負向調控炎癥相關信號通路,也可以因其RNA酶活性靶向并降解病毒RNA而實現(xiàn)廣譜抗病毒。在這部分的工作中,我們在功能學方面全面驗證了MCPIP1對IAV增殖的抑制作用,結果表明MCPIP1過表達后明顯抑制病毒結構蛋白基因在RNA和蛋白水平的表達以及感染性子代病毒的產生,而抑制MCPIP1表達時則顯著促進了IAV的增殖。以往的研究還表明MCPIP1主要特異性識別RNA莖環(huán)結構,并在轉錄水平調控RNA的穩(wěn)定性。據(jù)此,我們通過檢測RNA半衰期的方法證實了MCPIP1是通過靶向降解和縮短IAV M和NP基因m RNA的半衰期,進而抑制了病毒基因的表達。此外,對IAV總共8個m RNA二級結構預測結果表明,其每個基因節(jié)段的二級結構中包含眾多的莖環(huán)結構,這提示我們MCPIP1具備潛在靶向和降解IAV各節(jié)段基因表達的物質基礎。最后,為了回答IAV是否通過mi R-9直接靶向抑制MCPIP1的表達進而有利于自身復制,我們開展了下述工作。通過熒光酶報告基因實驗、Real-time PCR和western blot實驗確證mi R-9可以直接靶向并反向調控MCPIP1的表達。mi R-9與MCPIP1共轉染細胞后檢測病毒結構蛋白和感染性子代病毒的實驗結果表明mi R-9可通過直接抑制MCPIP1促進IAV的復制,至少部分通過MCPIP1途徑實現(xiàn)。上述研究結果表明,IAV可以有效利用宿主的mi R-9以微調細胞內的微環(huán)境,通過mi R-9/MCPIP1互作有效抑制宿主抗病毒應答,最終有利于病毒自身感染和復制的完成。
【關鍵詞】：miR-9 單核細胞誘導蛋白-1 流感病毒 復制
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R373;S852.65
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 英文縮寫詞表9-11
• 引言11-13
• 第一篇 文獻綜述13-25
• 第一章 miRNA與病毒復制13-22
• 1 病毒編碼的miRNA與病毒復制13-16
• 2 宿主編碼的miRNA對病毒復制的影響16-21
• 小結21-22
• 第二章 MCPIP1的研究進展22-25
• 1 MCPIP1的發(fā)現(xiàn)22
• 2 MCPIP1的結構22-23
• 3 MCPIP1的RNase酶活性與生物學功能23-24
• 4 MCPIP1 的去泛素化酶活性與生物學功能24
• 小結24-25
• 第二篇 研究內容25-66
• 第一章 IAV誘導表達的miR-9 促進了病毒的IAV復制25-43
• 1 材料25-26
• 2 方法26-32
• 3 結果32-39
• 4 討論39-42
• 5 小結42-43
• 第二章 MCPIP1對IAV復制的影響43-57
• 1 材料43-44
• 2 方法44-47
• 3 結果47-54
• 4 討論54-56
• 5 小結56-57
• 第三章 miR-9 通過靶向MCPIP1調控流感病毒復制57-66
• 1 材料57
• 2 方法57-60
• 3 結果60-64
• 4 討論64-65
• 5 小結65-66
• 結論66-67
• 參考文獻67-74
• 導師簡介74-75
• 作者簡介及在學期間所取得的科研成果75-76
• 致謝76

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 于學東;姜濤;陳水平;鄧永強;韓劍峰;趙慧;李曉峰;劉然;于曼;秦成峰;秦鄂德;;登革4型病毒5′非編碼區(qū)SLB元件對病毒復制和翻譯的調控作用[J];解放軍醫(yī)學雜志;2008年07期

2 胡克勤,喻植群,李方和,張永源,郝連杰;乙型肝炎病毒前S蛋白檢測及其與病毒復制標志的關系[J];上海免疫學雜志;1989年06期

3 曾令蘭;熊開鈞;黃華芳;何生松;羅端德;王心禾;代家珠;劉紅艷;;乙型肝炎病毒持續(xù)感染患者細胞內病毒復制的研究[J];病毒學雜志;1991年01期

4 ;快訊[J];生物工程學報;2010年04期

5 張陽根,胡雅遠,江先海;檢測PHSAR的固相血凝法[J];上海免疫學雜志;1991年01期

6 高飛;鄭浩;姜一峰;李麗薇;鄭海紅;周艷君;韋祖樟;童光志;;豬繁殖與呼吸綜合征病毒5'非翻譯區(qū)一頂端莖環(huán)結構是病毒復制轉錄必需的順式作用元件[J];中國動物傳染病學報;2014年04期

7 戴利成;王翠妮;何建方;錢佳平;王偉洪;施柏年;;血清乙肝病毒外膜大蛋白檢測及其與病毒復制的關系[J];中華實驗和臨床病毒學雜志;2006年03期

8 陳湖光;馬亦林;;流行性出血熱病毒致病作用的研究進展(綜述)[J];浙江醫(yī)科大學學報;1991年03期

9 朱艷萍;蔣建東;彭宗根;;APOBEC3G抑制病毒復制作用機制研究進展[J];藥學學報;2014年01期

10 祝婷;丁心平;萬延民;劉連興;彭虹;黃相剛;馮晏萌;鄔超;阮玉華;韓麗鳳;邢輝;王建軍;蘇斌;徐臣;徐建青;邵一鳴;;GBV-C/HIV共感染對AIDS疾病進程和HIV病毒復制的影響[J];病毒學報;2008年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 江玲;許智慧;劉妍;李曉東;姚偉明;李韋杰;戴久增;辛紹杰;徐東平;;HBV基因組A1846T變異對病毒復制力及核心啟動子活性的上調作用研究[A];第7屆全國疑難及重癥肝病大會論文集[C];2013年

2 戴煒;郭亞兵;楊大國;唐蔚;袁靜;王召欽;舒丹;;深圳地區(qū)HBV感染者病毒前C區(qū)變異與病毒復制水平關系[A];第九次全國中西醫(yī)結合肝病學術會議論文集[C];2000年

3 李艷梅;梁國棟;張仲凱;方榮祥;郝小江;;Glaucogenin C及其苷抑制正鏈RNA病毒復制活性及其作用機制研究[A];中國化學會第二十五屆學術年會論文摘要集（下冊）[C];2006年

4 許利軍;吳南屏;;CD38分子和HIV感染的關系[A];2005年浙江省感染病、肝病學術會議論文匯編[C];2005年

5 陸偉;張占卿;;血清β2-微球蛋白與慢性肝炎疾病程度和病毒復制之間的關系[A];中華醫(yī)學會全國第九次感染病學學術會議論文匯編[C];2006年

6 孫正偉;孫向陽;王威;董振芳;;乙型肝炎病毒基因分型與病毒復制的關系[A];第五屆全國肝臟疾病臨床暨中華肝臟病雜志成立十周年學術會議論文匯編[C];2006年

7 王強;汪光蓉;凡瞿明;何蘭;蔡艷娟;毛明;杜琴;張國元;;乙型肝炎病毒核酸相關抗原在評價病毒復制中的應用價值[A];中華醫(yī)學會第九次全國檢驗醫(yī)學學術會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學術會議論文匯編[C];2011年

8 江玲;許智慧;劉妍;辛紹杰;徐東平;;HBV基因組C1913A/G變異對病毒復制力影響及核心區(qū)融合蛋白pEGFP-Core-N1真核表達載體的構建[A];第7屆全國疑難及重癥肝病大會論文集[C];2013年

9 宋煜;楊曉霞;王沛麗;程欣;韓陽;羅震;曹燕華;祝成亮;劉映樂;劉芳;鄔開朗;吳建國;;EV71激活的早期生長反應蛋白1通過直接與病毒的5′非翻譯區(qū)結合從而促進病毒復制[A];2013年湖北省暨武漢微生物學會會員代表大會暨學術年會論文摘要集[C];2013年

10 黃利華;蔣躍明;童福易;曹立森;黃祖瑚;;HBVPreC/C變異對抗-HBc缺失和病毒復制的影響[A];中華醫(yī)學會第七次全國感染病學術會議論文匯編[C];2001年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 中證證券研究中心;重啤疫苗抑制病毒復制無顯著優(yōu)勢[N];中國證券報;2012年

2 毛磊;阻止非典病毒復制鼠可“自產”抗體[N];醫(yī)藥經濟報;2004年

3 唐風;美稱Rab9蛋白與病毒復制有關[N];中國醫(yī)藥報;2005年

4 方留民;硒的保健作用[N];中國食品質量報;2001年

5 聞欣;Trim5-α可抑制HIV復制[N];醫(yī)藥經濟報;2004年

6 記者 江南;中歐非典研究獲重大進展[N];人民日報海外版;2005年

7 劉彬;乙肝需要復查的化驗項目有哪些[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2005年

8 張濤 譯;老藥沖鋒在前沿[N];醫(yī)藥經濟報;2002年

9 毛文波;可抑制艾滋病病毒復制的特效分子問世[N];科技日報;2007年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 鄧萍;蕪菁花葉病毒CI蛋白參與病毒復制和運動及其與寄主的相互作用研究[D];福建農林大學;2015年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張琦;桿狀病毒DNA甲基化及其在病毒復制過程中的作用初探[D];復旦大學;2012年

2 李治;抑癌基因Arid2對HBV病毒復制的調控及分子機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2015年

3 王環(huán)茹;P小體相關蛋白MOV10結合于EV71基因組5’UTR并調控病毒復制[D];南京大學;2016年

4 董春艷;miR-9與MCPIP1互作對流感病毒復制的影響[D];吉林大學;2016年

5 李瀅;慢性乙型肝炎病毒感染病毒復制與肝細胞內質網應激反應相關性的初步探討[D];遵義醫(yī)學院;2013年

6 李亮亮;豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5與細胞凋亡和病毒復制關系的初步研究[D];西北農林科技大學;2014年

7 賈麗潔;ICP27特異性siRNA抑制HSV-1病毒復制的實驗研究[D];鄭州大學;2010年

8 張馳;天然免疫分子Tetherin的克隆、表達及對流感病毒復制的影響[D];汕頭大學;2011年

9 于毅;強的松對HBV感染小鼠體內病毒復制影響的實驗研究[D];川北醫(yī)學院;2013年

10 田小星;HMGB1在HBV復制中的作用研究[D];重慶醫(yī)科大學;2012年

  本文關鍵詞：miR-9與MCPIP1互作對流感病毒復制的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：315793